Construction of animal foamy virus vector and development of enzootic bovine leukosis vaccine

动物泡沫病毒载体的构建及牛地方性白血病疫苗的研制

基本信息

批准号：
22H02500
负责人：
目堅博久
金额：
$ 10.98万
依托单位：
University of Miyazaki
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

牛伝染性リンパ腫は、牛伝染性リンパ腫ウイルス(BLV)の感染を原因とする牛の慢性致死性感染症である。畜産業の経済的被害が大きく、感染対策が難しいことから、ワクチンの実現が望まれている。1980および90年代の論文では、不活化ワクチンで2度免疫した後の中和抗体価が高い時期であれば、BLVの感染を阻止できることが報告されている。そこで本研究は、牛のフォーミーウイルスにBLV抗原を組み込むことで、中和抗体価を終生高い値で維持できるBLVワクチンの開発を目指す。本研究は、研究項目①.組換え牛フォーミーウイルスの作成、研究項目②.BLVとの組換えウイルス作成と接種プロトコルの最適化、研究項目③.牛への組換えウイルス接種で構成される。1年目である2022年度は、研究項目①と②を実施した。①については、組換えウイルスの大臣確認申請を終え、現在、組換えウイルスの作成に取り組んでいる。②については、牛フォーミーウイルス野外株を使い、マウスを使った感染実験系を構築している。マウスに牛フォーミーウイルスの感染培養細胞の上清や感染細胞自体を接種する手法を検討した結果、長期間培養した培養細胞上清を接種した場合でのみ、一部のマウスの脾臓で感染が成立することがわかった(感染28日後、PCR法による確認)。現在、感染した脾臓からの感染性ウイルスの回収とウエスタンブロット法による抗体保有状況の検討を行っている。なお、3つの遺伝子型(欧州型、米国-アジア型、第III型)については、感染性に大きな違いは認められなかった。

牛肉染色的淋巴瘤是一种由牛淋巴瘤病毒（BLV）感染引起的牛肉的慢性精神感染疾病。希望疫苗是因为牲畜行业的经济损害很大，很难防止感染。 1980年和1990年代的论文报道说，在不可靠的疫苗中免疫后两次免疫后，可以预防BLV感染。因此，本研究旨在开发一种可以通过将BLV抗原纳入牛的形式病毒中，以高寿命维持中等节奏的抗体价格。这项研究由研究项目组成（1）。在2022年，第一年，进行了研究项目（1）和②。关于（1），我们已经完成了确认重组病毒的申请，目前正在创建重组病毒。关于（2），我们使用小鼠使用牛皮病毒户外库存建立了一个感染实验系统。由于对小鼠感染的培养细胞进行检查，并接种感染细胞本身，只有在接种长期培养的培养细胞时才能用一些小鼠建立感染。，通过PCR方法确认）。目前，它正在从受感染的脾脏中恢复传染病，并通过Western印迹方法检查抗体保持状态。三种遗传类型（欧洲，美洲类型，III型）的感染没有主要差异。