霊長類消化管オルガノイドを用いたホルモンと神経伝達物質の検出法の確立

灵长类胃肠道类器官检测激素和神经递质方法的建立

• 批准号: 22H02290
• 负责人: 岩槻 健
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02290/
• 关键词: 霊長類; オルガノイド; ホルモン; 消化管; 神経伝達物質

本研究計画では、初年度に（1）霊長類消化管オルガノイドの作製と分化誘導系の構築を行い、並行して（2）マイクロデバイスの開発を開始することになっている。まず、旧京都大学霊長類研究所（現京都大学ヒト行動進化研究センター）にて小腸を採取し、東京農業大学にてオルガノイドを作製した。次に、様々な条件検討を行い、培地中から増殖因子を減らした上で、Notchシグナルの阻害剤であるDBZを添加することで内分泌細胞への分化誘導が促進されることがGIP、GLP-1、Motilin、Somatostatinなどのペプチドホルモン産生を調べることにより確認された。研究ペースが想定よりも早いため、3年目に予定していた単層培養系の構築を初年度に行った。まず、三次元である消化管オルガノイドを単層培養系にすることを試み、部分的に成功させた。しかし、単層培養の効率は高くないため、単層培養時の細胞状態や培養皿の表面処理について試験を繰り返し最適な条件を模索している。マイクロデバイスの開発は、コラーゲンゲルで中空構造を作製しその微小環境にオルガノイドが安定的に存在できるかを確かめた。現在までに、オルガノイドを完全にコラーゲン内の中空構造に配置できていないが、オルガノイドはコラーゲンゲル内に1週間ほど保持されることが確認されている。マイクロデバイスは手作りのため、3Dプリンターを使って試作を繰り返し、CO2インキュベーターの中でも形状が崩れず、灌流系に耐えうるマイクロデバイスの構築を目指している。

在该研究计划中，在第一年，（1）灵长类动物胃肠道器官的产生和诱导分化系统的构建，以及（2）微发行版的开发将并行。首先，小肠是在京都大学（现为京都大学人类行为进化研究中心）的前灵长类研究所收集的，并在东京农业大学生产了类器官。接下来，研究了各种疾病，并证实，通过检查培养基中降低培养基的生长因子并添加DBZ的生长因子后，通过检查GIP，GLP-1，MOTILIN和生长抑素等肽激素（例如GIP，GLP-1，MOTILIN和生长抑素）的产生来促进内分泌细胞的诱导，并添加Notch信号的抑制剂来促进分化诱导的细胞。由于研究速度比预期的要快，因此我们在第一年就进行了单层文化系统的建设，该系统是我们计划在第三年计划的。首先，我们试图将三维胃肠道器官变成单层培养系统，并部分成功。但是，由于单层培养的效率不高，因此我们在单层培养和培养皿的表面处理过程中反复测试了细胞状况，并寻求最佳条件。通过使用胶原蛋白凝胶创建一个空心结构来确认是否可以稳定存在类器官。迄今为止，尽管尚未完全放置在胶原蛋白内的空心结构中，但已证实类器官在胶原蛋白凝胶中保留了大约一周。由于微型发行版是手工制作的，因此他们反复使用3D打印机来创建原型，并旨在构建即使在CO2孵化器中也不会失去其形状的微发行版，并且可以承受灌注系统。

项目成果

霊長類消化管オルガノイドからの単層培養系構築と味細胞様細胞の解析

灵长类胃肠道类器官单层培养体系构建及味觉细胞样细胞分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 松井伸祐;有永理峰;坂口恒介;稲葉明彦;山根拓実;大石祐一;今井啓雄;岩槻健
• 通讯作者: 岩槻健

栄養物と危険物質の選択： オルガノイド培養系から学ぶ 消化管センサー細胞の役割

营养物质和有害物质的选择：从类器官培养系统中学习胃肠传感器细胞的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 松井伸祐;有永理峰;坂口恒介;稲葉明彦;山根拓実;大石祐一;今井啓雄;岩槻健;岩槻健
• 通讯作者: 岩槻健

Generation and characterization of non-human primate tuft cells using pancreatic duct organoid culture system

使用胰管类器官培养系统生成和表征非人灵长类簇细胞

• 发表时间: 2022
• 作者: 松井伸祐;有永理峰;坂口恒介;稲葉明彦;山根拓実;大石祐一;今井啓雄;岩槻健;岩槻健;岩槻健
• 通讯作者: 岩槻健

オルガノイド培養による味細胞様細胞の研究

类器官培养研究味觉细胞样细胞

• 发表时间: 2022
• 作者: 松井伸祐;有永理峰;坂口恒介;稲葉明彦;山根拓実;大石祐一;今井啓雄;岩槻健;岩槻健;岩槻健;岩槻健;岩槻健
• 通讯作者: 岩槻健

味覚受容機構を介した消化管における生体防御機構の解析

味觉受体机制介导的胃肠道生物防御机制分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 松井伸祐;有永理峰;坂口恒介;稲葉明彦;山根拓実;大石祐一;今井啓雄;岩槻健;岩槻健
• 通讯作者: 岩槻健