バベシア原虫の完全長cDNAライブラリーを活用した新規診断・予防用抗原の探索

利用巴贝虫原生动物全长 cDNA 文库寻找新的诊断和预防抗原

• 批准号: 22248035
• 负责人: 五十嵐 郁男
• 金额: $ 7.74万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22248035/
• 关键词: バベシア原虫; cDNAライブラリー; 比較ゲノム解析; 新規診断用抗原; 予防用抗原

バベシア病は、ダニの媒介により動物に感染し世界的規模で畜産業に甚大な被害を与え、また人にも感染可能で人獣共通感染症としても注目されている。本研究は、バベシア病の制圧のため、バベシア原虫完全長cDNAライブラリーを構築し、その遺伝子情報を解析する事により、バベシア原虫の赤血球への侵入、赤内型増殖、赤血球からの脱出に関する因子を探索し、新規の血清及び遺伝子診断法の開発を目的としている。22年度は、牛バベシアBabesia bovisのスフェリカルボディー4(BbSBP4)遺伝子の性状及びコードしている蛋白質の診断用抗原の有効性について検討を行った。その結果、BbSBP-4は世界的に広く保存されている遺伝子であり、コードする蛋白質は、赤血球内発育の後期に強く発現される事が明らかとなった。また、BbSBP-4蛋白質を用いたELISAはこれまで報告されている抗原よりも感度及び特異性が高い事がアジア・アフリカの試料を用いて明らかとなり、今後、世界的な疫学調査に有用であることが示唆された。また、人にも感染するB. microtiのBM94およびBmSA1組換え抗原を作製し、ELISA及びイムノクロマト法について検討した。その結果、これらの組換え抗原を用いたELISAやイムノクロマト法は、特異性が高く、マウス感染実験及びひと感染血清においても、感染後長期間に渡り抗体検出が可能であった。更に、バベシア原虫に対する有効薬剤候補のスクリーニングを行い、trepen nerolidol及びartesunateが牛、馬、犬及びマウスのバベシアに対して増殖抑制効果を有する事を示した。これらの研究成果は、バベシア病に対する有効診断法や治療法の実用化に向け、今後の更なる検討が必要である。

巴贝虫病通过蜱传播给动物，在全球范围内对畜牧业造成严重损害。由于它也可以传播给人类，因此它作为一种人畜共患病也引起了人们的关注。为了控制巴贝虫病，本研究构建了全长巴贝虫原虫cDNA文库并分析了其遗传信息，旨在探索和开发新的血清和遗传诊断方法。 2012 年，我们研究了牛巴贝虫球体 4 (BbSBP4) 基因的特性以及所编码的蛋白质作为诊断抗原的有效性。结果表明，BbSBP-4是一个在世界范围内广泛保守的基因，其编码的蛋白质在红细胞内发育的后期强烈表达。此外，使用亚洲和非洲的样本表明，使用BbSBP-4蛋白的ELISA比迄今为止报道的抗原具有更高的灵敏度和特异性，并且这对于未来的全球流行病学调查是有用的。此外，我们还创建了也可以感染人类的​​重组田鼠抗原BM94和BmSA1，并研究了ELISA和免疫层析方法。因此，使用这些重组抗原的ELISA和免疫层析方法具有很高的特异性，并且在小鼠感染实验和人感染血清中感染后可以长时间检测到抗体。此外，我们还筛选了对巴贝虫原虫有效的候选药物，结果表明，橙花叔醇和青蒿琥酯对牛、马、狗和小鼠的巴贝虫具有抗增殖作用。这些研究结果需要今后进一步研究，以便将有效的巴贝虫病诊断和治疗方法付诸实践。

项目成果

人獣共通感染症(トキソプラズマ症(415-418p)、バベシア症(419-422p))(木村哲・喜田宏編、改訂版)

人畜共患疾病（弓形体病 (415-418p)、巴贝斯虫病 (419-422p)）（由 Satoshi Kimura 和 Hiroshi Kida 编辑，修订版）

• 发表时间: 2011
• 作者: 小杉賢一朗;藤本将光;三道義己;水山高久;木下篤彦;岡本敦;網野功輔;亀田尚志;池原浩平;西鳥健二;五十嵐郁男
• 通讯作者: 五十嵐郁男

Spherical body protein 4 is a new serological antigen for the global detection of Babesia bovis infection in cattle.

球体蛋白4是一种新的血清学抗原，用于全球检测牛巴贝虫感染。

• 发表时间: 2011
• 作者: M.Alaa Terkawi;他9名
• 通讯作者: 他9名

Drug discovery against Babesia and Toxoplasma, pp453-468. In Aplicomplexan Parasites : Molecular approaches toward targeted drug development (Katja Backer ed.).

针对巴贝虫和弓形虫的药物发现，第 453-468 页。

• 发表时间: 2011
• 作者: Mohamad Alaa Terkawi;Ikuo Igarashi
• 通讯作者: Ikuo Igarashi

Babesia miaroti : Molecular and antigenic characterizations of a novel 94-kDa protein (BmP94).

Babesia miaroti：新型 94-kDa 蛋白 (BmP94) 的分子和抗原特征。

• 发表时间: 2011
• 期刊: Exp Parasitol.
• 作者: Ooka H;Terkawi MA;Goo YK;Luo Y;Li Y;Yamagishi J;Nishikawa Y;Igarashi I;Xuan X.
• 通讯作者: Xuan X.

Molecular characterization of a new spherical body protein of Babesia bovis and evaluation of its potential use for serdiagnosis.

牛巴贝虫新型球体蛋白的分子表征及其在血清诊断中的潜在用途评估。

• 发表时间: 2010
• 作者: Ikuo Igarashi;他5名
• 通讯作者: 他5名