ヒトパレコウイルス3型の受容体同定と感染重症化機序の解明

人副肠孤病毒3型受体的鉴定及感染严重程度机制的阐明

基本信息

批准号：
19K08294
负责人：
渡邉香奈子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K08294/
关键词：
ウイルス受容体細胞への侵入ヒトパレコウイルス3型蛍光タンパク質発現組換えヒトパレコウイルス3型 CRISPR/ Cas9 レトロウイルスベクター cDNAライブラリーパレコウイルスA 新生児感染症

项目摘要

ヒトパレコウイルス3型（PeV-A3）は、多くの場合、軽微な胃腸炎や上・下気道炎などをきたす乳幼児感染症の原因ウイルスである。しかしながら、PeV-A3が新生児あるいは早期乳児に感染すると、敗血症様症候群、脳脊髄膜炎などの重症感染症を発症し、4カ月未満児の入院率は7.5人/1,000人である。PeV-A3は腸管上皮もしくは気道上皮細胞などに感染すると考えられているが、感染機構、宿主細胞域の全体像、感染の組織特異性および重症感染症を引き起こす分子機構は不明である。本研究ではPeV-A3のウイルス受容体を同定することによって、宿主細胞域や組織特異性を明らかにする。更に、同定した受容体を発現する動物モデルを樹立し、個体レベルでのPeV-A3感染症の分子機構を解析することにより、新生児において重症化する病態の全容解明を目指している。ヒト由来PeV-A3高感受性細胞（HuTu-80）とヒト遺伝子をターゲットとするCRISPR/Cas9ライブラリーを用いてゲノムワイドランダムノックアウトスクリーニングを実施し、最も多くノックアウトされたMyeloid-associated differentiation marker (MYADM)遺伝子について検討を行った。ハムスター由来のPeV-A3非感受性細胞（BHK-21）にMYADMを強制発現させたBHK-MYADM細胞にPeV-A3を感染させると、細胞変性効果（CPE）の出現と感染性ウイルスの産生が確認された。次に、HuTu-80細胞において、MYADM遺伝子をノックアウトしたMYADM-KO細胞ではCPEの出現と感染性ウイルスの産生は認められなかった。PeV-A3以外のPeV-A1, A2, A4, A5, A6についてもMYADM-KO細胞とBHK-MYADM細胞への感染実験を行い、PeV-A3と同様の結果を得た。

人类副肠病毒 3 型 (PeV-A3) 是一种引起婴幼儿感染的病毒，通常会引起轻度胃肠炎和上、下呼吸道感染。然而，当PeV-A3感染新生儿或早期婴儿时，会出现脓毒症样综合征、脑膜炎等严重感染，4个月以下儿童的住院率为7.5/1,000。 PeV-A3被认为感染肠上皮或呼吸道上皮细胞，但感染机制、总体宿主细胞范围、感染的组织特异性以及导致严重感染的分子机制尚不清楚。在本研究中，我们将通过鉴定PeV-A3的病毒受体来阐明宿主细胞范围和组织特异性。此外，通过建立表达所识别受体的动物模型并在个体水平分析PeV-A3感染的分子机制，我们的目标是充分阐明新生儿恶化的病理状况。使用人源性 PeV-A3 高敏感细胞 (HuTu-80) 和针对人类基因的 CRISPR/Cas9 文库进行全基因组随机敲除筛选，我们研究了骨髓相关分化标记物 (MYADM) 被敲除最多的情况。基因。 MYADM在仓鼠来源的PeV-A3不敏感细胞(BHK-21)中被迫表达当BHK-MYADM细胞被PeV-A3感染时，证实了细胞病变效应(CPE)的出现和感染性病毒的产生。完成了。接下来，在HuTu-80细胞中，在MYADM基因被敲除的MYADM-KO细胞中没有观察到CPE的出现和感染性病毒的产生。除PeV-A3外，还使用PeV-A1、A2、A4、A5和A6感染MYADM-KO细胞和BHK-MYADM细胞，获得了与PeV-A3类似的结果。

项目成果

期刊论文数量（15）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Development of Novel PCR Assays for Improved Detection of Enterovirus D68

DOI：
10.1128/jcm.01151-21
发表时间：
2021-11-01
期刊：
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY
影响因子：
9.4
作者：
Ikuse, Tatsuki;Aizawa, Yuta;Saitoh, Akihiko
通讯作者：
Saitoh, Akihiko

国内の小児入院施設における新生児、早期乳児のパレコウイルスA3感染症の前胞子的疫学調査 -第1報

国内儿科住院机构新生儿及早产儿副肠孤病毒A3感染前孢子流行病学调查第1次报告

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
萩原秀俊;松本　浩;立石昇一朗;植松賢司;座波清誉;浅野貴子;三宅紀子;松本直通;野々山恵章;大嶋勇成;相澤悠太　宇田和宏　伊藤健太　庄司健介　大竹正悟　笠井正志　鈴木優子　渡邉香奈子　齋藤昭彦
通讯作者：
相澤悠太　宇田和宏　伊藤健太　庄司健介　大竹正悟　笠井正志　鈴木優子　渡邉香奈子　齋藤昭彦

Persistence of High Neutralizing Antibody Titers after Neonatal and Early Infantile Infection with Parechovirus-A3.

新生儿和早期婴儿感染副肠病毒 A3 后高中和抗体滴度的持续性。