３次元イメージングによる骨髄造血幹細胞ニッチの同定

3D成像鉴定骨髓造血干细胞生态位

• 批准号: 26893185
• 负责人: 国崎 祐哉
• 金额: $ 0.92万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-08-29 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26893185/
• 关键词: 造血幹細胞; 骨髄微小環境; ３次元イメージング

本課題遂行する上で必須となるレーザースピニングディスク共焦点顕微鏡を九州大学に設置し、アルバートアインシュタイン医科大学で開発した骨髄ホールマウントイメージング技術の立ち上げを行った。更に、本研究課題に必要な複数のマウス系統NG2-creERTM/loxp-Tomato/Nes-GFP、Lepr-cre / loxp-Tomatoを導入しそれぞれのコロニーを樹立し、実験動物の安定した使用が可能となった。本研究課題の本年度予定していた(1)　異なる血管性ニッチ（細動脈性、骨髄洞性）による造血幹細胞機能の制御機構の解明に関しては、Paul Frenette研究室との共同研究により、効率的に実験を行い、予備実験で認められたNG2-creERTM/CXCL12-floxマウス系統における表面マーカーによる造血幹細胞の減少を、骨髄移植によるCompetitive repopulation実験により、機能的に証明することに成功した。(2) 造血を支持する骨髄間質細胞分化の階層化と機能解析に関しては、Osx-creERマウス系統を用いたlineage tracingを行うことにより、 マウス新生児段階のOsx発現細胞は、造血幹細胞ニッチを構成するレプチン受容体陽性細胞の前駆細胞であることを明らかにした(Mizoguchi et al. Dev. Cell 2014)。更に、NG2-creERTM/loxp-Tomatoによるより長期的なlineage-tracingを行った結果、NG2陽性細胞の骨髄内での増加は認められず、細動脈周囲NG2陽性細胞は、生理的条件下では静止状態にあり組織維持には寄与しておらず、放射線や抗がん剤投与のよる骨髄傷害時にのみストローマや骨に分化することで組織再生に寄与することを明らかにすることができた。

激光旋转磁盘CO -FOCUS MICROSCOPE对于执行此任务至关重要，是在京都大学建立的，并在Albert Einstein医科大学开发了骨髓骨髓的成像技术。此外，本研究所需的多个小鼠系统ng2-creertm/loxp-tomato/nes-gfp，Lepr-cre/loxp-tomato引入了每个菌落，并且可以使用实验室动物。今年的计划（1）关于不同的血管壁ches（动脉壁che，骨髓窦），通过与Paul Frenette实验室有效研究有效地阐明了由于不同的血管壁che（动脉壁che，骨髓窦）而导致的造血干细胞功能的控制机制。在初步实验中识别的NG2-Creertm/cxcl12-肝小鼠系统中的造血干细胞通过骨髓移植成功证明了在初步实验中识别的小鼠系统。 （2）关于骨髓间质细胞分化的血瘤细胞分化和功能分析，小鼠新生相中的OSX表达细胞通过使用OSX-creer小鼠系统进行谱系追踪来构成造血干细胞壁细胞。阳性细胞阳性细胞的前体细胞（Mizoguchi等人Dev。Dev。Cell，2014）。此外，由于NG2-Creertm/loxp-tomato的长期谱系追踪，NG2阳性细胞不允许在骨髓中增加，而动脉周围的NG2阳性细胞在生理条件下是固定的它处于一个状态，并没有促进组织的维持，并且发现它仅在放射性药物和抗癌药给药期间仅在骨髓损伤期间通过分化为stramas和骨骼而导致组织再生。

项目成果

血液フロンティア

血缘

• 发表时间: 2017
• 作者: 波多江龍亮;茶本健司
• 通讯作者: 茶本健司

実験医学

实验医学

• 发表时间: 2011
• 作者: 松田憲之;尾勝圭;田中啓二
• 通讯作者: 田中啓二

日本臨床

日本临床

• 发表时间: 2015
• 作者: Shinchi H;Takao S;Maemura K;Mataki Y;Kurahara H;Hiwatashi K;Ino S;Sakoda M;Ueno S;Natsugoe S;新地洋之，前村公成，又木雄弘，蔵原 弘，樋渡清司，飯野 聡，迫田雅彦，上野真一，高尾尊身，夏越祥次;新地洋之，前村公成，又木雄弘，蔵原 弘，樋渡清司，飯野 聡，迫田雅彦，上野真一，高尾尊身，夏越祥次;新地洋之，前村公成，又木雄弘，蔵原 弘，樋渡清司，飯野 聡，迫田雅彦，上野真一，高尾尊身，夏越祥次;新地洋之， 前村公成，又木雄弘，蔵原 弘，川崎洋太，南 幸次，飯野 聡，迫田雅彦，上野真一，高尾尊身，夏越祥次;新地洋之， 前村公成，又木雄弘，蔵原 弘，高尾尊身，夏越祥次
• 通讯作者: 新地洋之， 前村公成，又木雄弘，蔵原 弘，高尾尊身，夏越祥次

The distinct vascular niches determine hematopoietic stem cell fate

不同的血管生态位决定造血干细胞的命运

• 发表时间: 2014
• 作者: Yuya Kunisaki

NG2+ arteriolar pericytes form niches for dormant hematopoietic stem cells

NG2小动脉周细胞形成休眠造血干细胞的生态位

• 发表时间: 2015
• 作者: Morita K;Shirabe K;Taketomi A;Soejima Y;Yoshizumi T;Uchiyama H;Ikegami T;Yamashita YI;Sugimachi K;Harimoto N;Itoh S;Ikeda T;Maehara Y;Yuya Kunisaki
• 通讯作者: Yuya Kunisaki