魚類の核内受容体PXRシグナル経路の撹乱に関わる新規分子機構とその毒性学的意義

鱼类核受体PXR信号通路破坏的新分子机制及其毒理学意义

• 批准号: 26881001
• 负责人: 久保田 彰
• 金额: $ 0.92万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-08-29 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26881001/
• 关键词: ゼブラフィッシュ; PXR; AHR; シトクロムP450 (CYP); 細胞内受容体; クロストーク; シグナル伝達; PCB

本年度の成果は、以下のように要約できる。（１）発達期ゼブラフィッシュにおいてpregnane X receptor（PXR）の標的遺伝子の発現量を変動させる化学物質を探索した。受精後48時間の胚にビスフェノール類（BPA、BPF、BPAF；各0.001μM～10μM）を曝露したところ、いずれもPXR発現量に影響を及ぼさなかったものの、シトクロムP450（CYP）3A65発現量を低下させる傾向を示した。（２）複数の雌雄成魚のランダム交配から得た受精卵（20個／ペトリ皿）を用いてクロトリマゾール（CLO；3μM）の曝露試験を繰り返し実施したところ、CYP3A65の誘導性に実験間で差異が認められた。CLO応答性およびCLO低応答性を示した実験について、それぞれPXRの塩基配列を解析したところ、一塩基変異（SNPs）の出現パターンに差異が認められた。一例として、184番目のアミノ酸はCLO応答性ではセリン（pxr*1型）、CLO低応答性ではイソロイシン（pxr*2型）が顕在化していた。これらPXRアレルとCLO応答性／低応答性の関連性については今後の課題となった。（３）ゼブラフィッシュ胚でPXR・aryl hydrocarbon receptor type 2（AHR2）・CYP1/2/3分子種の発現調節に対するPXR・AHR2の役割を、モルフォリノアンチセンスを用いた遺伝子ノックダウン法で検討した。得られた結果より、PXRはセルフアップレギュレーションされること、ならびにPXRはAHR2・CYP1/2/3分子種の転写調節に、AHR2はPXR・CYP1/2/3分子種の転写調節にそれぞれ関与することが明らかとなった。こうした結果は、PXR・AHR2シグナル伝達系の間に双方向性のクロストークが存在することを示唆している。

今年的结果可以总结如下。 （1）在开发期，在发展期内，我们搜索了在预内X受体（PXR）中波动靶向基因量的化学物质。受精后，暴露于48个小时的胚胎上暴露的双酚（BPA，BPF，BPAF；每个0.001μm至10μm），但没有一个影响PXR的表达，但是Citochrome P450（CYP）3A65降低了趋势。它。 （2）在使用受精卵（20片 / petri板）对Crotrimazole（CLO;3μM）进行了反复的暴露测试后，从多个雄性和雌性鱼类的随机穿越获得了CYP3A65的差异。分析PXR的基本序列，以显示表现出CLO响应和CLO低响应特性的实验，识别了一个-Salt组变化（SNP）的外观模式的差异。例如，第184个氨基酸是CLO响应中的丝氨酸（PXR*1类型），在CLO低反应性能中，异亮氨酸（PXR*2类型）。这些PXR ALLEL和CLO响应 /低应变性的相关性一直是未来的挑战。 （3）PXR/AHR2在斑马鱼胚胎中PXR/AR碳氢化合物受体2型（AHR2），CYP1/2/2/3形成的作用在斑马鱼胚胎中的作用。使用吗啡蛋白ananzense的下降方法。从结果中，PXR受自动调节，PXR将移至AHR2/CYP1/2/3的转录，AHR2将重新定位为PXR/CYP1/2/2/2/cyp1/2/ 3个分子物种。这些结果表明，PXR和AHR2信号传输系统之间存在双向交叉讨论。

项目成果

PXR and AHR both are involved in transcriptional regulation of pxr, CYP2 and CYP3 genes in developing zebrafish

PXR和AHR均参与斑马鱼发育过程中pxr、CYP2和CYP3基因的转录调控

• 发表时间: 2014
• 作者: Kubota;A.;Goldstone;J.V.;Lemaire;B.;Stegeman;J.J.
• 通讯作者: J.J.

Transcriptomic effects of ortho-PCBs on developing zebrafish

邻位多氯联苯对斑马鱼发育的转录组效应

• 发表时间: 2015
• 作者: Goldstone;J.V.;Lemaire;B.;Kubota;A.;Stegeman;J.J.
• 通讯作者: J.J.

Zebrafish PXR inhibition in vivo by human PXR agonists

人 PXR 激动剂在体内抑制斑马鱼 PXR

• 发表时间: 2015
• 作者: Stegeman;J.J.;Lemaire;B.;Kubota;A.;Harbeitner;R.;Goldstone;J.V.
• 通讯作者: J.V.

The PXR "gene battery" in zebrafish

斑马鱼的 PXR“基因电池”

• 发表时间: 2015
• 作者: Goldstone;J.V.;Harbeitner;R.;Kubota;A.;Lemaire;B.;Stegeman;J.J.
• 通讯作者: J.J.

Cytochrome P450 20A1: Diversity and potential functions of a major orphan P450s

细胞色素 P450 20A1：主要孤​​儿 P450 的多样性和潜在功能

• 发表时间: 2015
• 作者: Lemaire;B.;Goldstone;J.V.;Lam;D.;Kubota;A.;Nelson;D.;Stegeman;J.J.
• 通讯作者: J.J.