臨床応用を視野に入れたヒト腸管上皮幹細胞の純化と培養法の開発

人肠上皮干细胞纯化培养方法的开发及临床应用

基本信息

批准号：
23890204
负责人：
佐藤俊朗
金额：
$ 2.08万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011-08-24 至 2013-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23890204/
关键词：
腸管上皮幹細胞粘膜再生治療 Wntシグナル

项目摘要

炎症性腸疾患は原因不明の慢性炎症性腸疾患であり,免疫統御療法により治療される.しかし,難治性炎症性腸疾患では,その効果が乏しい.我々は,そのような難治症例では粘膜の再生障害が原因であると考え,粘膜再生治療の開発を目指している.粘膜再生治療実現のための,非臨床試験として,マウス大腸より培養大腸上皮オルガノイドを作成し,マウス腸炎モデルに対して経肛門的投与を行い,投与したオルガノイドの生着が確認できた.また,オルガノイド移植群は非移植群に比して腸炎に対する治療効果を認めた.長期間培養した組織幹細胞を移植し,生着させる技術は他の臓器を見ても例がなく,今回の成果は粘膜再生治療を実現させるため,重要な進展となった.次のステップとして,ヒト腸管上皮幹細胞培養技術の開発が求められる.我々は,既にマウス腸管上皮幹細胞培養を確立しているが,本培養方法ではヒト腸管上皮幹細胞の培養は困難であった.そこで,マウス大腸上皮細胞培養の条件に加え,Nicotinamide,A83-01(Alk inhibitor),SB203580(p38 inhibitor)を追加したところ,世界で初めてヒト腸管上皮幹細胞の長期培養に成功した.長期培養されたヒト腸管上皮細胞は染色体異常など,形質転換をすることはなく,正常な分化を保持していた.本成果は粘膜再生治療のみならず,ヒト上皮細胞疾患の研究に非常に有用な技術である.

炎症性肠病是一种未知原因的慢性炎症性肠病，并接受免疫控制疗法治疗。但是，在棘手的炎症性肠病中，其有效性很差。我们认为，在这种棘手的情况下，原因是由于粘膜再生疾病造成的，旨在发展粘膜再生疗法。作为实现粘膜再生疗法的非临床试验，从小鼠结肠中产生了培养的结肠上皮器官，并对小鼠肠炎模型进行了跨植物给药，并植入了类器官。此外，器官植入物组在非移植组中。相比之下，观察到对肠炎的治疗作用。没有其他用于长期培养的组织干细胞并将其雕刻的技术，这是在实现粘膜再生治疗方面的重要进步。下一步是开发人类肠上皮干细胞培养技术。我们已经建立了小鼠肠上皮干细胞培养物，但是主要培养方法使培养人肠上皮干细胞变得困难。因此，除了小鼠结肠上皮细胞培养的条件外，烟酰胺，A83-01（ALK）添加抑制剂（SB203580）和SB203580（p38抑制剂）是世界上首次成功的人类肠上皮上皮细胞的长期培养。在长期培养中培养的人肠上皮细胞没有转化，例如染色体异常，并保留了正常的分化。这一发现不仅是对粘膜再生疗法的一种非常有用的技术，而且对于对人上皮细胞疾病的研究也是一种非常有用的技术。