皮膚バリアを担う角質細胞脂質エンべロープの形成機序の解明と魚鱗癬治療への展望

阐明在皮肤屏障中发挥作用的角质细胞脂质包膜的形成机制，以及鱼鳞病治疗的前景

• 批准号: 22K20918
• 负责人: 伊藤 靖敏
• 金额: $ 1.58万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20918/
• 关键词: 脂質エンベロープ; 魚鱗癬; 皮膚バリア; ABCA12; SDR9C7; 角質細胞脂質エンベロープ; 遺伝性皮膚疾患; 脂質解析

本研究では遺伝性角化症の一つである、道化師様魚鱗癬（harlequin ichthyosis. 以下 HI）の病態解明を目指し、新規治療法開発に直結する基礎的なデータを得ることを目的とした。1つ目は、Abca12機能喪失変異によるHIモデルマウスにおけるcorneocyte lipid envelope（以下 CLE）の形成状態を解析し、CLEを形成するアシルセラミドの由来を解明する。2つ目は、 ABCA12変異を持つHI患者、および、健常者皮膚角層のテープストリッピングによる脂質解析を行い、ABCA12変異による角層の機能脂質の組成の変化を明らかにすることである。透過型電子顕微鏡を用いてCLEの形成を形態学的に評価した。組織検体にあらかじめPyridine処理を行うことで、透過電顕の観察時に、CLEを可視化することができた。すでにAbca12、Sdr9c7のモデルマウスのCLEを可視化することができた。ABCA12機能喪失をもつ患者と健常者に皮表面のテープストリッピングを行い、角層を採取した。採取した角層をメタノールに浸して超音波処理を行い、遊離セラミドを除いて角質のみにした。その後アルカリ処理によりオメガ水酸化セラミドとして遊離させ検出した。検出した脂質発現の差を検討し、CLEの形成状況を解析した。ABCA12機能喪失患者では形成状況は健常人と有意な差は認められなかった。Abca12機能喪失モデルマウスと野生型マウスについて、胎生18.5日で帝王切開を行い胎児マウスの皮膚組織を採取した。採取した組織からRNAを抽出してマイクロアレイ解析を行い、脂質関連の遺伝子発現の差を検討した。脂質関連の遺伝子発現の低下はなかったが、炎症性サイトカイン関連の遺伝子発現の増加を認めた。

在这项研究中，目的是阐明遗传角度之一的小丑般的Epromos（HI，HI）的状况，并获得与新疗法发展直接相关的基本数据。首先是分析由于ABCA12功能性脱落和HI模型小鼠的HI模型小鼠中角膜细胞脂质包膜（CLE）的形成，并阐明形成CLE的庇护酰胺的起源。第二个是对健康皮肤角层的ABCA12突变和胶带剥离的HI患者进行脂质分析，以阐明由于ABCA12突变引起的角膜层的组成的变化。使用透明的电子显微镜评估CLE的形成。通过事先在组织样品中进行吡啶治疗，在观察透明电子学期间可以看到CLE。我已经能够可视化ABCA12和SDR9C7模型小鼠的CLE。对患者，健康的患者和健康的人进行了ABCA12胶带，并收集了角质层。将收集的角膜浸入甲醇中，进行超声处理，仅排除角蛋白，除非游离神经酰胺。此后，碱性处理作为欧米茄 - 羟基神经酰胺释放并检测到。检查了检测到的脂质表达之间的差异，并分析了CLE形成状态。在ABCA12功能损失的患者中，形成状态与健康人没有显着差异。 ABCA12损失模型小鼠和野生型小鼠是18.5天内的剖宫产，以收集胎儿小鼠的皮肤组织。从收集的组织中提取RNA，进行微藻分析，并检查了与脂质相关的基因表达的差异。尽管脂质相关的基因表达没有降低，但炎性细胞因子相关基因表达的增加已被识别。