歯根膜由来幹細胞による血管構造形成メカニズムの解明

阐明牙周膜干细胞形成血管结构的机制

• 批准号: 21890240
• 负责人: 大久保 直登
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21890240/
• 关键词: 再生医療; 血管新生; 間葉系幹細胞; 歯根膜; 三次元培養

研究実施計画に示していたように、自身で樹立した単一の歯根膜細胞初代培養系から派生した2種類の細胞、1)血管形成能の高い細胞群と2)低い細胞群の血管形成能力の違いに着目し、この2種類の細胞間での遺伝子発現様式についてcDNAマイクロアレイを用いて網羅的に調査を行った。その結果、血管形成能力の高いもののみに優位に発現する遺伝子を"血管形成誘導能力の発現を制御すると思われる候補遺伝子"として選定を行うことに成功した。その後、マイクロアレイの結果より見出した複数の遺伝子を指標に、1)の細胞群において血管形成にかかわると思われるさまざまな刺激を行った際の各遺伝子の発現を調べた結果、特徴的な発現パターンを示す遺伝子群を見出した。興味深いことに、この遺伝子群の中には、その発現に正または負の相関関係を示すものがあり、現在ウェスタンブロットやリアルタイムPCR法などを用いて確認中である。さらに、上記においてピックアップしたモデル遺伝子の中から真の血管新生誘導遺伝子をin vitroにおいて絞り込むため、候補とした遺伝子に対するsi RNAを作成し、該当候補遺伝子のノックアウトを行うことにより血管形成が起こらなくなりうるかも現在調査中である。また、in vitro三次元血管形成誘導モデルにおいても、Tie-2遺伝子の強発現部位(血管形成性細胞)と弱発現部位(非血管形成性細胞)を見出しているが(Okubo.et.alJ.Vasc.Res.2010)、この歯根膜幹細胞による上記の2部位に対するレーザーマイクロダイセクションによる組織サンプルからのmRNAを抽出する作業を進め、さまざまな方法により、"歯根膜由来細胞の血管形成能力を制御する遺伝子"の同定を目指している。

如研究实施计划所示，我们使用cDNA微阵列进行了全面的研究，以研究源自我们自己建立的牙周韧带细胞的单一原发性培养系统的两种类型的细胞之间的基因表达模式，重点介绍了具有高血管生成能力的1）细胞血管生成能力的差异。结果，我们成功选择了仅由具有高血管生成能力的人作为“被认为调节血管生成诱导能力表达的候选基因的基因”。之后，使用从微阵列结果中发现的多个基因作为指标，我们研究了每个基因的表达当在细胞组1中似乎参与血管生成的各种刺激时，我们发现了一组具有独特表达模式的基因。有趣的是，其中一些基因组的表达表现出正相关或负相关，目前正在使用Western blotting，实时PCR等确认。此外，为了从上面选择的模型基因中缩小体外诱导真正的血管生成基因的缩小，为候选基因的Si RNA中的Si RNA创建并从相应的候选基因中删除，目前正在研究中以防止血管生成发生。此外，在体外三维血管生成诱导模型中，我们发现了TIE-2基因的强表达位点（血管生成细胞）和弱表达位点（非血管生成细胞）（非血管生成细胞）（Okubo.et.Alj.Alj.vasc.2010），目前通过LIG在LASERSENTIC中提取MRNA，并通过LASERSENTION提取MRNA，并通过LASERSENTIC提取MRNA，并在Lasserssection中提取MRNA，并在Lasserssection中提取MIRNA，并将其延伸。旨在使用各种方法鉴定“调节牙周韧带衍生细胞的血管生成能力的基因”。

项目成果

歯根膜由来未分化間葉系細胞幹細胞による血管内皮細胞マーカー陽性血管構造の形成

牙周膜来源的未分化间充质细胞干细胞形成内皮细胞标志物阳性血管结构

• 发表时间: 2009
• 作者: 荒木信;本島清人;大久保直登;荒木信;大久保直登;荒木信;大久保直登;大久保直登;荒木信;大久保直登
• 通讯作者: 大久保直登

歯根膜由来幹細胞による血管内皮細胞マーカー陽性血管構造の形成

牙周膜干细胞形成内皮细胞标志物阳性血管结构

• 发表时间: 2009
• 作者: 永谷勝也;簑田清次;荒木信;大久保直登
• 通讯作者: 大久保直登

歯根膜由来間葉系細胞による血管内皮細胞マーカー陽性血管構造の形成

牙周膜来源的间充质细胞形成内皮细胞标志物阳性血管结构

• 发表时间: 2010
• 作者: 荒木信;本島清人;大久保直登;荒木信;大久保直登
• 通讯作者: 大久保直登

Vascular Cell-Like Potential of Undifferentiated Ligament Fibroblasts to Construct Vascular Cell-Specific Marker-Positive Blood Vessel Structures in a PI3K Activation-Dependent Manner

• DOI: 10.1159/000277724
• 发表时间: 2010-01-01
• 期刊: JOURNAL OF VASCULAR RESEARCH
• 影响因子: 1.7
• 作者: Okubo, Naoto;Ishisaki, Akira;Kitagawa, Yoshimasa
• 通讯作者: Kitagawa, Yoshimasa

歯根膜由来幹細胞様細胞による3次元培養下における血管内皮細胞マーカー陽性血管様構造の形成

使用牙周膜来源的干细胞样细胞在 3D 培养中形成血管内皮细胞标记物阳性的血管样结构

• 发表时间: 2009
• 期刊: 口腔組織培養学会誌 19
• 作者: 荒木信;本島清人;大久保直登
• 通讯作者: 大久保直登