A Study on Signal Transductions of MSC Culture in Total Autologous Angiogenic Therapy

MSC培养物在全自体血管生成治疗中的信号转导研究

• 批准号: 20K09133
• 负责人: 福田 尚司
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K09133/
• 关键词: エクソソーム; 血管新生; 間葉系細胞; 再生医療; 重症下肢虚血; マイクロRNA; 間葉系幹細胞

【実験条件の確立】①間葉系細胞培養上清回収の条件確立、②エクソソーム測定に適した間葉系細胞培養培地の決定、③培養上清からエクソソーム精製の至適条件確立、④精製されたエクソソームからRNA抽出条件の確立、⑤マトリジェルを用いたHUVEC培養条件の確立【実験方法の確立】①精製した培養上清中の粒子数測定の妥当性確認、②同上上清中のエクソソーム数測定の妥当性確認、③血管新生関連マイクロRNAに関するRNA抽出および定量的PCRの妥当性確認、④マトリジェルを用いたHUVEC培養の妥当性の確認【対象】若年者および老年者の間葉系細胞培養上清【結果】上清中の粒子数、エクソソーム数の確認により、血管新生関連マイクロRNA（miR-9、miR-105、miR-126、miR-135、miR-210）の有無について明らかにした。また、同マイクロRNAに関し、世代による差についての定量結果を得た。

[实验条件的建立]①建立间充质细胞培养上清液收集条件，②确定适合外泌体测量的间充质细胞培养基，③建立从培养上清液中纯化外泌体的最佳条件，④纯化外泌体？ ⑤ 使用Matrigel建立HUVEC培养条件 [实验方法的建立] ① 纯化培养上清液中颗粒数测量有效性的确认， ② 同一上清液中外泌体数测量的验证， ③ 确认血管生成相关 microRNA 的 RNA 提取和定量 PCR 的有效性， ④ 确认使用 Matrigel 的 HUVEC 培养的有效性 [对象] 年轻人和老年人的间充质细胞培养上清液 [对象] [结果]通过检查上清液中的颗粒和外泌体的数量，我们澄清了血管生成相关的microRNA（miR-9、miR-105、miR-126、miR-135、miR-210）的存在或不存在。我们还获得了关于相同 microRNA 的代际差异的定量结果。