マラリア原虫の肝臓ステージ後期の寄生機序の解明

阐明疟疾寄生虫在肝脏晚期的寄生机制

• 批准号: 21890172
• 负责人: 石野 智子
• 金额: $ 1.7万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21890172/
• 关键词: マラリア原虫; 肝臓ステージ; 寄生胞

蚊の吸血の際に注入されたマラリア原虫スポロゾイトが、最初に肝細胞に寄生し何千ものメロゾイトへと増殖・分化するのが人への感染の最初のステップとなる。本研究は、肝細胞におけるマラリア原虫の寄生の分子基盤の解明を目的とし、特に肝臓ステージ後期に特異的に発現する原虫タンパク(LISP1)を足がかりにして、本年度は以下の研究を実施した。肝臓ステージ後期に起きる寄生胞の崩壊に関わるLISP1蛋白の挙動を解析することで、寄生胞崩壊プロセスを解析することを目論み、ネズミマラリア原虫の一種であるP.bergheiを用いてGFPタグを融合させたLISP1を発現する遺伝子改変原虫を作出した。さらに、原虫細胞質を可視化するために生活環を通じて細胞質にRFPを発現するような遺伝子改変原虫も作出した。これらを掛け合わせることで、肝臓ステージ後期の原虫の寄生胞崩壊のタイミングをin vitroでリアルタイムに解析する準備が整う。さらに、LISP1が寄生胞崩壊に関わる機構を解明する目的で、寄生胞崩壊を担う候補プロテアーゼであるSERA1、および寄生胞膜に局在が知られるEXP1の挙動をin vitroで観察できるように、上記と同じくGFPタグを融合させた各々の蛋白を発現させる組換え原虫作成のためのコンストラクトを作成した。LISP1欠損原虫とこれらのGFPタク蛋白発現原虫を掛け合わせることで、LISP1の寄生胞崩壊における機能を解析するツールが用意できる。一方で、肝臓ステージに発現する原虫蛋白に対する抗体の準備も整った。

人类感染的第一步是，蚊子在蚊子期间注射的疟原虫会使肝细胞寄生并分化为数千种梅罗寄生。这项研究旨在阐明肝细胞中疟疾寄生虫的分子基础，尤其是，使用原生动物蛋白（LISP1）在今年进行了以下研究，该研究是在肝脏阶段的晚期表达的，该研究是作为阶梯石的。通过分析涉及寄生虫分解的LISP1蛋白的行为，该蛋白发生在肝脏阶段后期，我们的目的是分析寄生虫瓦解过程，并创建了一种转基因的原生动物表达LISP1，该原生动物表达LISP1，该原生动物使用P. berghei，一种类型的Murine Normine疟疾。此外，我们还创建了遗传修饰的原生动物，这些原生动物在整个生命周期中表达细胞质中的RFP，以可视化原生动物的细胞质。通过将这些结合在一起，我们准备在肝阶段晚期原生动物寄生虫的寄生寄生时期分析体外实时。此外，为了阐明与寄生崩解有关的机制，我们为创建重组原生动物的创建创建了一种与GFP标签融合的蛋白质的构造，以使Sera1的行为，候选蛋白酶的行为，一种候选蛋白酶，负责寄生分解，并且可以在上面构成同一范围的遗产，并且可以像在上面的竞争中那样遗产，并且可以像在上面的竞争中一样。通过将这些原生动物与表达GFP-TAC蛋白的这些原生动物相结合，我们可以提供一种工具来分析LISP1在寄生损伤中的功能。另一方面，还制备了针对在肝脏阶段表达的原生动物蛋白的抗体。

项目成果

LISP1 is important for the egress of Plasmodium parasites from liver cells

LISP1 对于疟原虫寄生虫从肝细胞中排出很重要

• 发表时间: 2009
• 作者: Tomoko ISHINO;Bertrand Boisson;Yuki Orito;Celine Lacroix;Emmanuel Bischoff;Celine Loussert;Chris Janse;Robert Menard;Masao Yuda;Patricia Baldacci
• 通讯作者: Patricia Baldacci

マラリアのほ乳類感染の成立機構を探る

探索哺乳动物感染疟疾的机制

• 发表时间: 2009
• 作者: 石野智子