顎顔面領域における神経障害の治療開発に向けたmicroRNAの機能解析

用于开发颌面部神经系统疾病治疗方法的 microRNA 功能分析

基本信息

批准号：
21890062
负责人：
古賀陽子
金额：
$ 1.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21890062/
关键词：
神経幹細胞神経損傷 microRNA 再生医療

项目摘要

【目的】頭蓋顎顔面領域における炎症、外傷、先天性疾患に起因する組織欠損や神経損傷に対して、組織再建が重要な課題となっている。申請者は、特に治療が困難とされている三叉神経痛((1)中枢神経に関連しておこる本態性(2)末梢領域における症候性)や顔面、舌神経麻痺などといった神経損傷や障害、創傷治癒の新たな治療開発を目指すのに際し、再生医療分野における基礎的な性状解析すなわち、増殖および分化を制御する機構や分子生物学的レベルでの解析が必要であると考えた。そして新たな治療法のアプローチとして、microRNAと中枢神経系の幹細胞の関係に着目し、大脳皮質特異的に全てのmicroRNAの発現を抑制させたDicer遺伝子操作マウス(DicerCKO)を用いて、in vitroにおける神経幹細胞の増殖能および分化能の検討を行った。【結果】(1)増殖能の検討:培養には、ニューロスフェア法を用いた。その結果DicerCKOにおいて、顕著なニューロスフェア数の減少と増殖能の低下が認められた。また、DicerCKOのニューロスフェアに未分化マーカーであるNestinが発現しているか否か検討を行い、その発現を確認できた。次に、得られたニューロスフェアが自己複製能を有しているか否かを検討し、非常に興味深いことに、継代したDicerCKOのニューロフェアはコントロール群と同様の自己複製能を有していることが認められた。(2)分化能の検討:得られたニューロスフェアに多分化能があるか否か検討を行ったところ、DicerCKOにおいてTuj1,GFAP,04のアブノーマルな分化能を認めた。【結語】以上の結果より、さらなる検討が必要ではあるが、microRNAが神経幹細胞および神経細胞運命を制御していることが示唆された。

目的：组织重建是组织缺陷和神经损伤的重要问题，由颅颌面区域的炎症，创伤和先天性疾病引起。 The applicant thought that basic characterization in the field of regenerative medicine, namely mechanisms that control proliferation and differentiation and molecular biological analysis are necessary when aiming to develop new treatments for nerve damage, disorders, and wound healing, such as trigeminal neuralgia (1) essentiality associated with the central nervous system (2) symptomatic peripheral areas), and facial and lingual nerve paralysis, which are considered difficult to treat, are 必要的。作为一种新的治疗方法，我们专注于microRNA和中枢神经系统干细胞之间的关系，并使用DICER-GENTINE小鼠（DICERCKO）检查了神经干细胞的增殖和分化潜力，这些小鼠（Dicercko）特别抑制了大脑皮质中所有microRNA的表达。 [结果]（1）对增殖能力的检查：使用神经圈方法进行培养。结果，在Dicercko中观察到神经球的数量显着减少，增殖能力的降低。此外，我们研究了在Dicercko的神经圈中表达未分化的标记的Nestin是否得到了证实。接下来，我们研究了所获得的神经球是否具有自我更新能力，非常有趣的是，转移的Dicercko的神经球具有与对照组相同的自我更新能力。（2）检查分化能力：当我们研究获得的神经球是否具有更大的潜力时，我们发现dicercko中Tuj1，GFAP和04的异常分化能力。 [结论]以上结果表明，尽管需要进一步研究，但MicroRNA控制神经干细胞和神经元细胞命运。