遺伝子編集技術を用いた表皮水疱症の多角的再生医療の開発

利用基因编辑技术开发大疱性表皮松解症多方面再生医学

基本信息

批准号：
15H05999
负责人：
新熊悟
金额：
$ 1万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-08-28 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H05999/
关键词：
遺伝子編集表皮水疱症 CRISPR/Cas9

项目摘要

本研究の目的は、7型コラーゲン遺伝子異常により発症する栄養障害型表皮水疱症に対する再生/遺伝子治療法の開発である。網膜など、局所的な疾患に対する再生医療が実用化しつつある。しかし、表皮水疱症のような全身の皮膚粘膜にまたがる病変を有する先天性疾患では、遺伝子治療を施した再生細胞を全身にわたり生着させる必要があり、根治的な再生治療の開発には目途が立っていない。本研究では、遺伝子変異部位を特異的に認識する遺伝子編集技術を用いた遺伝子治療を施した患者由来の皮膚細胞を直接患部に投与する局所的治療、間葉系幹細胞を全身投与し、局部で皮膚細胞に分化・機能する全身的治療を組み合わせた多角的な再生治療方法を開発する。上記の治療法を開発するため、本研究では、以下の研究を行う。1)劣性栄養障害型表皮水疱症患者からの表皮角化細胞・線維芽細胞・間葉系幹細胞の樹立する。2)7型コラーゲン遺伝子変異特異的CRISPR/Cas9技術を用いた遺伝子治療する。3)表皮水疱症モデルマウスや免疫不全マウスを用いた治療の効果と安全性を評価する。我々は、日本人に高頻度に認められ、重症型を呈する5818delCおよび6573+1G>C、比較的軽症なE2857Xを有した7型コラーゲン遺伝子変異特異的CRISPR/Cas9の作製に成功した。現在、栄養障害型表皮水疱症患者由来線維芽細胞に対し、遺伝子治療を行っている。今後、遺伝子治療を施した間葉系幹細胞を作製し、栄養障害型表皮水疱症モデルマウスを用いた治療効果と安全性の評価を行う予定である。

本研究的目的是开发一种针对大疱性表皮松解症的再生/基因治疗方法，大疱性表皮松解症是一种由7型胶原蛋白基因异常引起的营养障碍。针对视网膜等局部疾病的再生医学正在实用化。然而，对于大疱性表皮松解症等涉及全身皮肤和粘膜病变的先天性疾病，需要将经过基因治疗的再生细胞移植到全身，目前还没有开发出根治性再生治疗的前景。没站着。在这项研究中，我们将进行局部治疗，其中将来自接受过基因治疗的患者的皮肤细胞直接施用到患处，该基因编辑技术专门识别基因突变位点，而间充质干细胞则全身施用到局部治疗中。我们将开发一种多方面的再生治疗方法，结合使皮肤细胞分化和发挥作用的系统治疗。为了开发上述治疗方法，本研究将进行以下研究。 1) 从隐性营养不良性大疱性表皮松解症患者中建立表皮角质形成细胞、成纤维细胞和间充质干细胞。 2) 使用7型胶原蛋白基因突变特异性CRISPR/Cas9技术进行基因治疗。 3) 使用大疱性表皮松解症模型小鼠和免疫缺陷小鼠评估治疗的有效性和安全性。我们成功创建了针对 7 型胶原蛋白基因突变的 CRISPR/Cas9，这种突变在日本人中经常观察到，具有严重症状，如 5818delC 和 6573+1G>C，以及相对较轻的 E2857X。目前，正在对大疱性表皮松解症（一种营养性疾病）患者的成纤维细胞进行基因治疗。未来，我们计划产生经过基因治疗的间充质干细胞，并使用营养不良性大疱性表皮松解症小鼠模型评估治疗效果和安全性。