南米ペル-先インカ期時代人の分子生物学的解析

南美秘鲁-前印加人类的分子生物学分析

• 批准号: 07640953
• 负责人: 篠田 謙一
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07640953/
• 关键词: ペル-; チャンカイ遺跡; ミトコンドリアDNA; Dループ領域; 9塩基欠損

チャンカイ遺跡は、南米ペル-国リマ市近郊の海岸線に存在する、古典後期の遺跡である。墳墓の盗掘によって散乱状態にあった遺物を表土採集したコレクションが新潟大学医学部解剖学教室に保管されている。この遺跡からは多数の人工変形を伴う頭蓋が出土しており、頭蓋小変異の比較分析からは北米インディアンとの類似が指摘されている。また、歯の形態は典型的なSinodontyを示し、四肢を含めた計測学的な研究からは、高地原住民との間に形態学的な相違があることがわかっている。このコレクションの中から、自然状態でミイラ化したサンプルより0.1〜0.3グラムの筋肉を採取し、Proteinase Kを用いた消化を行った後、フェノールとクロロホルムによるDNAの抽出、精製を実行した。更にろ過膜を用いた濃縮と脱塩を行った後、この溶液に対してシリカによるDNAの吸着作用を利用した精製を行った。こうして得られたDNA溶液に対して、人類学的に意味のあるミトコンドリアDNAの二つの部分を増幅するプライマーセットを用いてPCR反応を実行した。その結果、14個体でミトコンドリアDANのD-ループ領域の190塩基対の増幅に成功し、5体でV領域の増幅に成功した。アメリカ原住民では、アジア人と同様にV領域に9塩基の欠損を持つグループが存在することが知られている。今回増幅に成功した5個体は、いずれも正常なグループに属する個体であったが、南米の高地原住民では9塩基欠損の比率が総じて高く、チャンカイ人にこの様な欠損が見られないことは、集団の遺伝的な組成が異なっていることを示唆する。これは形態的な研究から見た相違とも一致している興味深い現象であるが、更にD-ループ領域の塩基配列を決定してこの集団の詳細な遺伝的な背景を明らかにする必要がある。

Chankai废墟是位于南美洲利马附近的海岸线上的后期古典废墟。尼加塔大学医学院解剖学系收集了坟墓发掘后分散的一系列文物。许多具有人工变形的头骨已经从该站点进行了挖掘，对小颅骨突变的比较分析表明与北美印第安人的相似之处。牙齿的形态还显示出典型的中源，包括四肢在内的计量学研究表明，它们与高地之间存在形态学差异。从该集合中，从以自然状态木乃伊的样品中收集0.1-0.3克肌肉，使用蛋白酶K消化，然后使用苯酚和氯仿提取并纯化DNA。此外，使用过滤膜浓缩并脱盐溶液，然后使用二氧化硅对DNA的吸附效果进行纯化。然后，使用底漆集对所得的DNA溶液进行PCR反应，该底漆集放大了人类学上有意义的线粒体DNA的两部分。结果，有14个人成功扩增了线粒体DAN的D环区的190个碱基对，而5个人成功扩增了V区域。众所周知，在美洲原住民中，像亚洲人一样，V地区有9个基本缺陷。所有五个成功的扩增都是正常群体中的个体，但是南美高地土著人民的九个基本缺陷的比例通常很高，而chankai人民中缺乏这种缺陷，这表明人口的遗传组成是不同的。这是一个有趣的现象，与形态学研究中看到的差异一致，但是有必要进一步确定D-Loop区域的基本序列以揭示该人群的详细遗传背景。