迅速・簡便・高感度Cold-SSCP法を用いた癌・前癌病変遺伝子変異の解析

使用快速、简单、高灵敏度的 Cold-SSCP 方法分析癌症/癌前病变基因突变

基本信息

批准号：
06671201
负责人：
宮田正彦
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671201/
关键词：
Cold-SSCP法遺伝子変異 p53 K-ras 乳腺腫瘍膵腫瘍

项目摘要

1.乳腺においては、腺偏平上癌の1例を解析した。ホルマリン固定パラフィン包埋組織の薄切切片から、腺癌、扁平上皮癌、脈管に浸襲した未分化癌および正常組織を採取した。脈管に侵襲した未分化癌をはじめとし、すべて2-4mm^2の微小病変を対象とし、K-ras exon 1,2、p53 exon5,6,7,8の領域について解析した。K-ras exon 1,2領域では遺伝子変異は認めなかったが、p53では、腺癌でexon5,7、扁平上皮癌でexon5,7,、脈管に侵襲した未分化癌でexon5,7,8の遺伝子異常を認めた。腺癌、扁平上皮癌、脈管に侵襲した未分化癌のp53 exon5の遺伝子異常はすべて異なったパターンを呈したが、exonではすべて同一パターンの遺伝子異常であった。これまでの比較的大きな組織量を用いた方法では困難であった同一腫瘍組織内における遺伝子上のheterogeneityの検討、更には組織型との詳細な比較検討も可能となった。膵臓においては、膵癌12例と膵ラ氏島腫瘍10例について検討した。ホルマリン固定パラフィン包埋組織の薄切切片から、腫瘍および正常組織を採取し、膵癌ではp53 exon5,6,7,8の領域、膵ラ氏島腫瘍ではK-ras exon1,2、p53 exon5,6,7,8の領域について解析した。膵癌では12例中9例'(75%)にp53の遺伝子変異を認めた。膵ラ氏島腫瘍では、10例中2例(20%)にK-rasの遺伝子変異を認め、10例中9例(90%)にp53の遺伝子変異を認めた。膵癌におけるp53の遺伝子変異はこれまでの報告(50-75%)と同様に比較的高頻度に認め、迅速、簡便な“cold-SSPP"法における検出感度の高さが証明された。膵ラ氏島腫瘍における癌関連遺伝子の変異についての報告は少なく、その関連は未だ明らかではない。今回の検討では高頻度にp53遺伝子の変異を認めており、p53遺伝子の膵ラ氏島腫瘍への関与が示唆された。今後、direct sequenceによる塩基配列の決定を行うとともに、更に膵癌、膵ラ氏島腫瘍などの癌関連遺伝子との関連を追求していく所存である。

1。在乳腺中，分析了腺体扁平癌的一个例子。从一块薄切的福尔马林固定石蜡包裹的组织中，它是从癌症和正常组织中收集的，这些组织已落入腺癌，鳞状质癌和脉搏管中。 K-RAS外显子1、2，P53外显子5、6、7、8的区域均为2-4mm^2，包括静脉管输入的非差异癌症。在K-RAS外显子1,2中，没有发现遗传突变，但是在p53，exon5，7用于腺癌，Exon5，7，无贫困癌症入侵了脉搏管外exon5，7,8。 p53 Exon5的所有遗传异常都被腺癌，鳞状埃德癌和福尔加罗姆入侵的所有模式都是不同的模式，但所有模式都是相同模式的相同模式。还可以检查同一肿瘤组织内基因的异质性，到目前为止，这很难使用相对较大的组织量，并与组织类型进行了比较和检查。在胰腺中，我们检查了12种胰腺癌和10个胰岛岛肿瘤。肿瘤和正常组织是从福尔马林固定石蜡包裹的组织的稀疏中收集的，对于胰腺癌，p53外显子5,6,7,8区域，以及胰腺La Island肿瘤K-Ras Exon1，2，P53 Exon5，p53 Exon5， 6，分析7,8的面积。在胰腺癌中，在p53基因突变中发现了12例（75％）。在胰岛岛肿瘤中，有10例（20％）识别的K-RAS基因突变中有2例，其中10例（90％）中有9例（90％）的基因突变为90％（90％）。胰腺癌中p53的基因突变已被相对高度认可为先前的报告（50-75％），并且已被证明具有快速，简单的“冷SSPP”方法的高检测灵敏度。关于胰腺肿瘤中癌症相关基因突变的报道很少，这种关系尚不清楚。在这项研究中，p53基因突变被高度识别，表明p53基因参与胰腺胰腺肿瘤。将来，我们将通过直接序列确定基本序列，并进一步追求与癌症相关基因（例如胰腺癌和胰腺月球肿瘤）的关系。