迅速・簡便・高感度Cold-SSCP法を用いた癌・前癌病変遺伝子変異の解析

使用快速、简单、高灵敏度的 Cold-SSCP 方法分析癌症/癌前病变基因突变

• 批准号: 06671201
• 负责人: 宮田 正彦
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671201/
• 关键词: Cold-SSCP法; 遺伝子変異; p53; K-ras; 乳腺腫瘍; 膵腫瘍; Cold-SSCP法; 遺伝子変異; p53; K-ras; 乳腺腫瘍; 膵腫瘍

1.乳腺においては、腺偏平上癌の1例を解析した。ホルマリン固定パラフィン包埋組織の薄切切片から、腺癌、扁平上皮癌、脈管に浸襲した未分化癌および正常組織を採取した。脈管に侵襲した未分化癌をはじめとし、すべて2-4mm^2の微小病変を対象とし、K-ras exon 1,2、p53 exon5,6,7,8の領域について解析した。K-ras exon 1,2領域では遺伝子変異は認めなかったが、p53では、腺癌でexon5,7、扁平上皮癌でexon5,7,、脈管に侵襲した未分化癌でexon5,7,8の遺伝子異常を認めた。腺癌、扁平上皮癌、脈管に侵襲した未分化癌のp53 exon5の遺伝子異常はすべて異なったパターンを呈したが、exonではすべて同一パターンの遺伝子異常であった。これまでの比較的大きな組織量を用いた方法では困難であった同一腫瘍組織内における遺伝子上のheterogeneityの検討、更には組織型との詳細な比較検討も可能となった。膵臓においては、膵癌12例と膵ラ氏島腫瘍10例について検討した。ホルマリン固定パラフィン包埋組織の薄切切片から、腫瘍および正常組織を採取し、膵癌ではp53 exon5,6,7,8の領域、膵ラ氏島腫瘍ではK-ras exon1,2、p53 exon5,6,7,8の領域について解析した。膵癌では12例中9例'(75%)にp53の遺伝子変異を認めた。膵ラ氏島腫瘍では、10例中2例(20%)にK-rasの遺伝子変異を認め、10例中9例(90%)にp53の遺伝子変異を認めた。膵癌におけるp53の遺伝子変異はこれまでの報告(50-75%)と同様に比較的高頻度に認め、迅速、簡便な“cold-SSPP"法における検出感度の高さが証明された。膵ラ氏島腫瘍における癌関連遺伝子の変異についての報告は少なく、その関連は未だ明らかではない。今回の検討では高頻度にp53遺伝子の変異を認めており、p53遺伝子の膵ラ氏島腫瘍への関与が示唆された。今後、direct sequenceによる塩基配列の決定を行うとともに、更に膵癌、膵ラ氏島腫瘍などの癌関連遺伝子との関連を追求していく所存である。

1。在乳房中，分析了一个合理的腺癌。腺癌，鳞状细胞癌，脉管侵入性未分化的癌症和正常组织是从福尔马林固定的石蜡填充组织的薄切片中收集的。分析了所有2-4 mm^2微片，包括侵入血管的未分化的癌症，分析了K-RAS外显子1,2，p53外显子5,6,7,8的区域。在K-RAS外显子1和2区域中未观察到基因突变，但是在p53时，在腺癌中的外显子5和7中观察到基因异常，外显子5和7在鳞状细胞癌中的外显子5和7中观察到了侵袭Vcuculature的未分化的癌症中的鳞状细胞癌中的基因异常。腺癌，鳞状细胞癌和血管侵入性未分化癌症中p53外显子5的遗传异常均表现出不同的模式，但所有外显子都具有相同的遗传异常模式。已经有可能研究同一肿瘤组织内基因的异质性，这很难使用迄今为止使用相对较大的组织体积的方法来处理，并且还可以将异质性与组织类型进行比较和比较。在胰腺中，检查了12例胰腺癌和10例胰岛肿瘤病例。肿瘤和正常组织是从福尔马林固定石蜡包含的组织的薄切片中收集的，并在胰腺癌中分析了p53 Exon5、6、6、7、8的区域，以及K-Ras Exon1、2和p53 Exon5 Exon5，6，6，6，6，6，6，6，6，6在胰腺癌中，12例（75％）中有9例显示了p53的基因突变。在胰腺胰岛肿瘤中，在10例（20％）病例中有2例观察到K-RAS基因突变，并且在10例中，有9例p53基因突变。与以前的报道（50-75％）一样，胰腺癌中的p53基因突变相对频繁，并且被证明使用快速，简单的“冷SSPP”方法对检测非常敏感。胰岛胰岛肿瘤中与癌症相关基因突变的报道很少，并且该关联尚不清楚。这项研究表明，p53基因突变的频率很高，表明p53基因参与胰岛肿瘤。将来，我们打算使用直接序列来确定基本序列，并进一步追求与癌症相关基因（例如胰腺癌和胰岛胰岛肿瘤）的关系。