動脈硬化症とカルシウムに関する研究

动脉硬化与钙的研究

基本信息

批准号：
61480247
负责人：
折茂肇
金额：
$ 3.2万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至 1988
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-61480247/
关键词：
血管平滑筋細胞トランスフォーミング成長因子-β 細胞内カルシウム細胞増殖上皮成長因子培養血管内皮細胞活性酸素低比重リポ蛋白質の透過性カルシウム拮抗薬培養血管平滑筋細胞細胞質カルシウム DNA合成成長因子

项目摘要

1.目的:動脈硬化における血管平滑筋細胞(SMC)の増殖は悪性腫瘍と異なり有限であり、その増殖を制御する因子の存在が想定される。TGF-Bは血小板に多く含まれ、多くの細胞の増殖を抑制することから、血小板由来のTGF-BがSMCの増殖に如何なる作用をもつか。またそれが細胞内カルシウム(Ca)を介するか否かを検討した。2.方法:(1)ラット大動脈由来培養SMCを96wellのディッシュに植立、0.01%牛胎児血清を含むMEM培地で48時間アレストした後、EGFと共にTGF-Bを加え36時間インキュベート後SMCに取り込まれた〔^3H〕チミジンをSMCのDNA合成の指標とした。また、同様な実験系でTGF-Bの細胞数に及ぼす影響も検討した。(2)TGF-BのSMCに対する傷害性をあらかじめ取り込ませた〔^3H〕-2-deoxy-D-glucose(〔^3H〕-G〕の放出を指標として検討した。(3)TGF-BのSMC内Ca濃度への影響をguin2を用いて検討した。3.結果:(1)EGF(100ng/ml)はSMCのDNA合成および細胞数を有意に増加させた。TGF-B(1-100ng/ml)の単独投与はDNA合成、細胞数に影響しなかったが、TGF-BをEGFと共に投与するとEGFによるSMCのDNA合成、細胞数の増加を用量依存的に抑制した。(2)TGF-Bの投与は〔^3H〕-Gの特異的放出をおこさなかった。(3)TGF-Bは、SMCの細胞内Ca濃度に影響しなかった。4.考察:本研究よりTGF-Bは単独でSMCの増殖に影響を与えないが、EGFによるその増加を用量依存的に抑制することが示された。このTGF-Bの増殖抑制作用は細胞傷害による非特異的な現象ではないこと、細胞内カルシウムの抑制によらないと考えられた。EGFは血小板中に含まれ動脈硬化の発症、進展に関与するとされるが、やはり血小板に含まれるTGF-BはEGFによるSMCの増殖を抑制し、抗動脈硬化的に働く可能性が示唆された。

1.目的：与恶性肿瘤不同，动脉硬化中血管平滑肌细胞（SMC）的增殖是有限的，并且推测存在控制这种增殖的因素。由于血小板中富含TGF-B并抑制许多细胞的增殖，那么血小板来源的TGF-B对SMC增殖有何影响？我们还研究了这种效应是否是由细胞内钙 (Ca) 介导的。 2.方法：（1）将培养的大鼠主动脉SMCs种植在96孔培养皿中，在含有0.01%胎牛血清的MEM培养基中滞留48小时，然后加入TGF-B和EGF，孵育36小时。 [^3H]胸苷在掺入 SMC 前数小时用作 SMC DNA 合成的指示剂。我们还在类似的实验系统中检查了 TGF-B 对细胞数量的影响。 (2)利用预先掺入的[^3H]-2-脱氧-D-葡萄糖([^3H]-G]的释放来研究TGF-B对SMC的毒性。(3)TGF-B使用guin2研究EGF对SMC中Ca浓度的影响。 3.结果：（1）EGF（100ng/。 ml) 显着增加 SMC 中的 DNA 合成和细胞数量，而单独施用 TGF-B (1-100ng/ml) 对 DNA 合成或细胞数量没有影响 (2) TGF-B 施用抑制 EGF 诱导的 SMC DNA 合成。和细胞数量增加。 (3) TGF-B 不影响 SMC 中的细胞内 Ca 浓度。 4. 讨论：本研究表明，单独使用 TGF-B 不会引起 [^3H]-G 的特异性释放。不影响SMC增殖，但以剂量依赖性方式抑制EGF诱导的SMC增殖。尽管EGF存在于血小板中并且被认为与动脉硬化的发生和进展有关，但EGF被认为不是由于细胞损伤而引起的非特异性现象，也不是由于细胞内钙的抑制所致。该蛋白中含有的TGF-B可以抑制EGF诱导的SMC增殖，并发挥抗动脉硬化的作用。