精巣の分化成熟を支配する精原細胞因子の解明

阐明控制睾丸分化和成熟的精原细胞因素

• 批准号: 14657412
• 负责人: 原 孝彦
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657412/
• 关键词: 精原細胞; セルトリ細胞; 精巣; 転写制御; 24p3; c-KIt; 遺伝子発現; c-Kit

我々は精原細胞以降の精子分化が停止しているJSD変異マウス精巣と精原細胞がほとんどないW/Wv変異マウス精巣との遺伝子発現を比較する研究を通じて、24p3やSui1など24種類の遺伝子が精原細胞依存的にセルトリ細胞で発現することを報告した。昨年、新生マウス精巣由来のセルトリ細胞株を新たに樹立し、精原細胞との共培養による24p3 mRNAの転写誘導をin vitroで再現することに成功した。今年度は、このアッセイ系を用いて転写活性化領域を徐々に短縮していき、精原細胞による24p3遺伝子の転写活性化に必要な責任領域を同定した。ここにはNFκBのコンセンサス配列が存在し、ゲルシフト解析とクロマチン免疫沈降法によりNFκBのp50,p65が24p3遺伝子プロモーター領域に特異的に結合することを見出した。さらにドミナントネガティブIκBαの強制発現により、精原細胞による24p3遺伝子の転写誘導は抑制された。24p3遺伝子の転写誘導活性は精原細胞の培養上清に存在し、IL-1やLPS刺激時よりも活性化の程度が高かった。以上の結果から、セルトリ細胞では精原細胞から分泌される物質によりNFκB経路が活性化され、24p3遺伝子の転写活性化が引き起こされていることが示唆された。最近、24p3遺伝子産物が精子の運動性あるいは細菌感染防御に働く可能性が報告されている。したがって、精原細胞は精巣のホメオスタシスを維持するために、炎症性反応と共通のシグナル伝達経路を利用しているものと推察される。本研究を通じて我々は、精原細胞側のファクターが精巣の機能成熟に関与することをはじめて示し、精原細胞からセルトリ細胞への逆シグナルの実在を証明した。本知見は、ヒトの生殖器官発達の分子設計図の理解にも大きく貢献するものと期待される。

我们报道说，通过一项研究比较了少数具有精子小鼠睾丸后的精子分化，在塞托利细胞中表达了24种类型的基因表达，包括24p3和sui1，以精子依赖细胞依赖性方式表达了精子分化的JSD突变小鼠睾丸之间的基因表达。去年，我们建立了一种新的sertoli细胞系，该细胞系源自新的小鼠睾丸，并通过与精子共同培养，在体外成功复制了243 mRNA的转录。今年，我们使用该测定系统逐渐缩短了转录激活区域，并确定了精子症对24P3基因转录激活所需的负责区域。这里有NFκB的共识序列，凝胶移位分析和染色质免疫沉淀显示NFκB的p50和p65特异性与24p3基因启动子区域有特异性结合。此外，强迫表达显性负IκBα抑制了精子症对24P3基因的转录诱导。 24P3基因的转录诱导活性存在于精子的培养上清液中，并且激活程度高于IL-1或LPS刺激的活性。以上结果表明，在Sertoli细胞中，NFκB途径被精子分泌的物质激活，从而导致24p3基因的转录激活。最近，据报道，24P3基因产物可以充当精子运动或保护细菌感染的一种形式。因此，据估计，精原性利用炎症反应常见的信号传导途径来维持睾丸稳态。通过这项研究，我们首次证明了精子因子与睾丸的功能成熟有关，证明了从精子细胞到Sertoli细胞的逆信号存在。这一发现有望有助于理解人类生殖器官发育的分子蓝图。

项目成果

K.Tanaka, H.Tamura, (5authors), T.Hara: "Spermatogonia-dependent expression of testicular genes in mice"Developmental Biology. 246. 466-479 (2002)

K.Tanaka、H.Tamura（5 位作者）、T.Hara：“小鼠睾丸基因的精原细胞依赖性表达”发育生物学。