損傷臓器の治癒再生を促進する分泌性タンパク質の解析

分析促进受损器官愈合和再生的分泌蛋白

• 批准号: 17659565
• 负责人: 原 孝彦
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659565/
• 关键词: FRP2; BRAK; 筋再生; マクロファージ; 幹細胞; 損傷治癒; アポトーシス; FRP2; BRAK; 筋再生; マクロファージ; 幹細胞; 損傷治癒; アポトーシス

筋ジストロフィーモデルマウスmdxでは、壊れた骨格筋繊維がただちに再生するため、筋ジストロフィー患者でおこる加齢依存的な運動能の重篤な低下には至らない。我々は、mdxマウスでは損傷臓器の治癒再生を促進する分子機構が働いているとの仮説を立て、mdxマウス骨格筋でが発現高進している分泌性タンパク質として、Frizzled related protein 2(FRP2)、およびマクロファージ走化性因子BRAKを同定した。FRP2はハブ毒注射により破壊された骨格筋の再生過程で大きく発現誘導され、さらにsiRNAを用いて筋芽細胞内のFRP2発現をノックダウンしたところ、急速な細胞死がおこった。したがって、FRP2タンパク質を損傷部位に投与することは、局所的な幹細胞・前駆細胞のプールを増加させ、結果として治癒促進につながる可能性がある。しかし、FRP2遺伝子のトランスジェニックマウスの筋再生能はコントロールマウスと差がなかった。筋損傷によって十分量の内在性FRP2が局所的に誘導されているものと推察される。一方、BRAK-KOマウスとmdxマウスとの2重変異マウスを作出したところ、このマウスでは血中クレアチンキナーゼ(CK)値がmdxマウスより低下していた。しかし、物理的な筋再生モデル実験においては、BRAK-KOマウスの筋再生能に変動はなく、骨格筋内のマクロファージ数にも顕著な差が観察されなかった。BRAK-KOマウスは特に雌においてコントロールマウスより体重が軽いため、CK値の低下はむしろ個体のエネルギー代謝と関連している可能性が高い。現在詳細な解析を続行している最中であるが、BRAKの生理的役割の解明は、個体のホメオスタシスにおけるマクロファージ系ケモカインの新しい機能解明につながると期待される。

在肌肉营养不良模型小鼠MDX中，骨骼肌纤维骨纤维骨骼立即再生，从而导致肌肉营养不良患者发生的运动性降低严重降低。我们假设一种分子机制促进受损器官的愈合再生在MDX小鼠中正在起作用，并鉴定出毛躁相关的蛋白2（FRP2），而巨噬细胞趋化因子将BRAK BRAK作为MDX小鼠骨骼肌中表达的分泌蛋白。 FRP2在骨骼肌的再生过程中被大量表达，而骨骼肌被轮毂注射破坏了，当使用siRNA击倒肌细胞中的FRP2表达时，发生了快速细胞死亡。因此，将FRP2蛋白施用到损伤部位可能会增加茎和祖细胞的局部库，从而增加愈合。但是，FRP2基因在转基因小鼠中的肌肉再生能力与对照小鼠的肌肉再生能力没有差异。据估计，肌肉损伤局部诱导了足够数量的内源性FRP2。另一方面，当在Brak-KO小鼠和MDX小鼠之间产生双重突变小鼠时，该小鼠中血肌酸激酶（CK）水平降低了，而不是MDX小鼠中的血液肌酸。但是，在物理肌肉再生模型实验中，brak-ko小鼠的肌肉再生能力没有变化，并且在骨骼肌中巨噬细胞的数量中没有明显差异。由于烤小鼠的重量小于对照小鼠，尤其是在女性中，因此CK水平的降低更有可能与单个能量代谢相关。目前，正在继续进行详细的分析，预计阐明BRAK的生理作用将导致省略巨噬细胞趋化因子在个别稳态中的新功能。