翻訳段階での遺伝子発現制御機構における大腸菌核様体タンパク質H-NSの機能解析

大肠杆菌核蛋白H-NS在翻译阶段基因表达调控机制中的功能分析

基本信息

批准号：
07680735
负责人：
上口智治
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

I.核様体タンパク質H-NSの機能ドメイン解析H-NSによってその転写が抑制されているpeoUオペロンの発現を指標にして、25種類のhns変異を分離した。このうち20種類のミスセンス変異はH-NS上で大きく3つの領域(N末端領域、C末端側2つの領域)に集中した。精製した変異タンパク質について生化学的解析を行ったところ、C末端側ドメインはDNAとの結合に、N末端側ドメインは転写抑制機能に必要な領域であることが示唆された。H-NSはホモダイマーを形成して機能することが知られているが、ダイマー形成にはN末端側2/3が必要十分であり、おそらくH-NSの中央部ドメインがそれに関与するのではないかと推測された。II.栄養飢餓ストレス応答機構の解明1)栄養飢餓ストレス応答の正の制御因子であるシグマ因子(シグマS)の発現制御にH-NSが負の調節因子として機能していることを見いだした。H-NSは栄養豊富な環境ではシグマSの翻訳を抑え、またシグマSタンパク質の不安定化を引き起こす。hns変異株中ではシグマSの脱抑制が起こり、細胞は対数増殖期においてもあたかも栄養飢餓状態にあるような生理状態にあることを見いだした。従ってH-NSは、利用可能な栄養環境に応答して細胞の生理的状態をスイッチする機構のキ-分子であると考えられる。2)シグマSの発現に関わる他の因子を検索し、一つの候補遺伝子を得た。

I.核体蛋白H-NS功能域分析域分析H-NS使用PEOU操纵子的表达分离了25种HNS突变，PEOU操纵子已被抑制。这些其他突变中有20个集中在H-NS上的三个大区域（N末端区域，C末端两个区域）上。对精制突变蛋白的生化分析表明，C末端结构域是与DNA的联系，而N末端结构域是转录控制功能所需的区域。众所周知，H-NS的形式和功能，但是N端2/3是必要的，足以形成一个昏暗的人，并且可能涉及H-NS的中心域。 ii。。在营养环境中，H-NS抑制了Sigma S的翻译，并导致Sigma S蛋白的不稳定性。在HNS突变体期间，Sigma S被抑制，他发现细胞在对数增殖期间似乎处于营养饥饿状态。因此，H-NS被认为是对可用营养环境响应的机制的机制，并切换了细胞的生理状况。 2）搜索Sigma S表达中涉及的其他因素并获得一个候选基因。