黄色ブドウ球菌の新たなADP-リボシル化毒素について

关于金黄色葡萄球菌新型 ADP-核糖基化毒素

• 批准号: 07670299
• 负责人: 三宅 眞実
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670299/
• 关键词: ブドウ球菌; ADP-リボシル化; 細菌毒素

本研究の目的は、咽頭粘膜感染症を起こした患者から分離した黄色ブドウ球菌の新たな病原因子としてADP-リボシル化活性を持つ物質(以下、ADPR-TOX)に着目し、その精製をめざすとともに性状を明らかにすることにある。ADPR-TOXはヒト白血病細胞HL-60の膜蛋白(分子量約80kDa、以下p80)をADP-リボシル化(以下、リボシル化)するが、その最適pH域は5-7.5で、37℃、60分間の反応で安定に検出された。|adenylate-^<32>P|NADの替わりに|^<32>P|ADP-riboseで反応を行うとp80のリボシル化が起こらないことから、p80のリボシル化は非酵素学的なリボシル化類似の反応の結果ではなく、他の細菌性リボシル化毒素と同様な典型的リボシル化反応によることが示唆された。また、ADPR-TOXは限外濾過膜の通過性から、分子量50-100kと予想され、60℃、10分間処理で失活する易熱性物質であった。菌を37℃、20時間培養した遠心上清を硫酸アンモニウムで濃縮して粗ADPR-TOX液とした。粗ADPR-TOX液を2回のDEAE-Toyopearlクロマトグラフィーに供した後、Superose、Phenyl-Sepharoseカラムを用いたFPLCによって精製を進めたが、まだ数本の混在蛋白質が見られ完全精製には至っていない。粗ADPR-TOX液中には、免疫学的方法によってα毒素とロイコシジンの存在が確認されたが、精製を進めることで前者はADPR-TOX画分と分離することができ、また後者はADPR-TOXと異なる挙動を示すことが明らかとなった。Superose後のリボシル化活性画分にはHL-60細胞への障害活性が存在しており、ADPR-TOXが細胞障害性を担っている可能性があると考えているが、この点は種々の培養細胞を用いて検討することが必要であると考える。

这项研究的目的是关注物质（ADPR-TOX，以下简称ADPR-TOX），是一种与患有咽粘膜感染的患者分离的链球菌的新原因（以下是ADPR-TOX）。 。 ADPR-TOX使人类白血病细胞HL-60（以下简称P80）的膜蛋白（分子量约为80kDa，以下是P80）（以下称为“以下称为“ revocyl，以下简称），但最佳pH区域为5-7.5，5-7.5， 37°C，60分钟60分钟。 |。类似于其他细菌revocytes毒素的典型复制反应。由于下滤膜的可传递性，ADPR-TOX的分子量预计为50-100k分子量，并且是一种在60°C和10分钟处无活性的加热物质。将细菌与硫酸铵浓缩，该铵通过37°C培养20小时。在两种Deae-Toyopearl色谱中使用粗adpr-tox溶液后，使用Superose，Superose，苯基 - 隔离柱进行了改进，但仍然可以看到一些混合蛋白，这是完全纯化的。在粗糙的adpr-tox液体中，通过免疫学方法证实了α毒素和白细胞的存在，但是通过继续进行，前者可以与ADPR-TOX分开，而后者则显然是ADPR-。与毒物不同的行为。 Superose核糖基化活性中的HL-60细胞具有残疾活性，我认为ADPR-TOX可能负责细胞疾病，但这是各种各样的点。培养细胞。