糸球体内皮細胞とメサンギウム細胞との細胞間相互作用にかんする研究

肾小球内皮细胞与系膜细胞间细胞相互作用的研究

• 批准号: 05670967
• 负责人: 川村 哲也
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05670967/
• 关键词: 糸球体内皮細胞; メサンギウム細胞; 細胞外基質; アンギオテンシン変換酵素阻害薬; ヘパラン硫酸プロテオグリカン; TV型コラーゲン; 細胞増殖; 細胞間相互作用

[目的]従来の研究から、培養メサンギウム細胞(MC)のphenotypeは、周囲の三次元的な細胞外基質環境によって修飾されることが知られている。我々の研究グループは、MCの三次元基質ゲル内での増殖能に関して、fibronectinは促進的に、type IV collagen(C‐IV)、laminin、heparan sulfate proteoglycan(HSPG)は抑制的に働くことを既に報告した。そこで、糸球体障害の進展・増悪における糸球体内皮細胞(GEnC)の意義を明らかにするため、GEnCが産生した細胞外基質(ECM)が、糸球体硬化と密接に関係するMCの増殖をいかに調節・制御するかについて、両者の培養細胞を用いて検討した。[方法]1)confluentに達したGEnCおよびMCを、それぞれ0.02M NH_4OHで処理することにより、細胞成分を溶解・除去し、GEnCおよびMCが産生したECM[それぞれE/ECMおよびM/ECMと略す]のみが付着したdishを作成し、この上に同一のMCを一定の密度で蒔き、その後の増殖能を経時的な細胞数測定により検討した。2)無刺激のGEnCが産生したECM[E/ECM]に加えて、アンギオテンシン変換酵素阻害薬(ACEI)(captopril 10〜500mug/ml)による刺激を受けたGEnCが産生したECM(ACEI+E/ECM)上でMCを培養した場合に、MCの増殖活性いかに変化するかについて検討した。3)ACEIによるGEnCのECM代謝への影響をノーザン・ブロット法にて検討した。[結果]1)MCのculture substrateへの付着数は、ACEI+E/ECM上ではE/ECM上に比し、約20%増加した。2)ACEI+E/ECM上では、E/ECM上に比し15〜20%程度の有意なMCの増殖抑制が認められた。3)captopril 10〜500mug/mlの刺激により、GEnCのC‐IVおよびHSPGのmRNAレベルは非刺激時の2〜3倍に増加した。[結論]GEnCによって産生されるECMが、MCの増殖を調節・制御している可能性が示唆された。またACEIはこのGEnCの基底膜型ECMの遺伝子発現を増強させることにより、GEnCとMCのcell‐cell communicationに関与している可能性が考えられた。

目的：先前的研究已经知道，培养的肾小球细胞（MC）的表型通过周围的三维细胞外基质环境来改变。我们的研究小组已经报告说，纤连蛋白与MC在三维底物凝胶中的增殖能力相关的IV胶原蛋白（C-IV），层粘连蛋白和硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）的作用。因此，为了阐明肾小球内皮细胞（GENC）在肾小球疾病的发展和加剧中的重要性，我们研究了GENC调节和控制MCS的增殖的细胞外基质（ECM）如何与肾小球巩膜相关，使用两种培养细胞密切相关。 [方法] 1）通过处理分别与0.02m的NH_4OH汇合的GENC和MC裂解并去除细胞成分，并制作了一种菜肴，其中只有GENC和MC产生的ECM（分别为E/ECM和M/ECM缩写为ECM和M/ECM的缩写），并通过量表进行了效率，并在稳定的时间内播种，并在常数的效率上进行了测量。 2）除了由未刺激的GenC产生的ECM外，我们还研究了当MCS在由GENC产生的ECM上培养的MCS的生长活性如何改变，该ECM被血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）刺激（Captopril 10-500mug/ml）。 3）使用Northern印迹研究了ACEI对GENC对ECM代谢的影响。 [结果] 1）与E/ECM相比，ACEI+E/ECM上对MC的培养基底物的附着次数增加了约20％。 2）与E/ECM相比，ACEI+E/ECM对MC生长的显着抑制作用约为15-20％。 3）在10-500mug/mL处刺激卡托普利在不刺激时增加了GENC 2-3倍的mRNA水平和HSPG。 [结论]有人提出，GENC生产的ECM可能调节和调节MC的扩散。此外，人们认为ACEI可能通过增强GENC基底膜ECM中的基因表达来参与细胞细胞的通信。