繊維化制御硬変肝をベッドとした増殖型肝細胞移植の研究

以控制纤维化的肝硬化肝为床的增殖性肝细胞移植研究

基本信息

批准号：
05454347
负责人：
田口喜雄
金额：
$ 4.22万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

平成5年度における研究結果は以下に示す通りである。1)肝硬変モデルの作成;四塩化炭素投与による肝硬変マウスを作成方法を確立し、この硬変肝マウスに30%の部分肝切除を行った。しかし、侵襲が大きいためか術後早期に80%が死亡し現在より安全な肝切除方法を検討中である。2)マウス肝細胞分離方法の確率;エルトリエーターを用いてマウスの肝実質細胞ならびに非実質細胞の分離条件の検討を行い、viabilityが80%の細胞が得られるようになった。3)門脈内抗原投与による免疫抑制状態の誘導;ラットを用いて、アロの細胞を継続的に経門脈内に投与し、移植後の免疫学的変化をMLRにて検討し、免疫抑制状態が半永久的に継続できることを明らかにした。この結果から、アロ胎児肝細胞を門脈内に移植した場合拒絶反応が予防できると考えられた。4)胎児肝細胞の分化誘導将来移植実験に使用する予定のマウスの胎児が成熟体内でどの様に分化するかを腎の皮膜下に移植し検討したが3ケ月間での検討ではまだどの様な細胞になるかは不明であり、現在検討を続けている。in vitroでもこの胎児肝細胞と肝実質細胞や非実質細胞と培養を行なったところ形態学的には肝臓に近いものがえられた。5)効率の良い細胞融合方法の確立;細胞融合についてはより効率的に融合させるため、レーザーによる細胞融合装置を用いて、胎児肝細胞と成熟肝実質細胞、非実質細胞とのハイブリッドを作成中であり、形態ならびに機能的変化については今後検討を行なう。6)アンチセンスヌクレオチドの作成;コラゲナーゼ・インヒビターを発現させる活性化遺伝子のmRNAに対応するアンチ・センス・ヌクレオチドの作成については現在作成中のp-2レベル遺伝子実験室が出来次第行う。7)アンチセンスヌクレオチドの導入;アンチ・センス・ヌクレオチドを挿入したプラズミドを含む潅流液での肝潅流、遺伝子の導入の程度の評価、肝の繊維化防止の程度ならびにエネルギー産生能の面から検討などの研究については今後の課題とした。

1993年的研究结果如下所示。 1）创建肝硬化模型；建立了氯化碳小鼠的一种方法，并在这种硬疗法的小鼠上消灭了30％的肝小鼠。然而，手术后有80％的人死亡，可能是由于大量入侵，我们正在考虑一种清除肝脏的方法。 2）肝细胞分离方法的小鼠肝细胞分离方法；使用ELT三生儿检查小鼠肝脏真实细胞和非基础细胞分离条件，生存力可以获得80％的细胞。 3）门户动脉抗原的免疫抑制作用；使用大鼠持续将ALO细胞施加到草静脉中，并检查了MLR移植后的免疫变化。 - 孤独。结果，人们认为在门静脉细胞中移植到门静脉中时可以预防排斥反应。 4）在未来移植的小鼠胎儿中，用于移植实验的胎儿肝细胞的分化诱导，如何在肾脏膜下移植成熟体内的胎儿，但是在三个月内，情况仍然未知它是否将是一个单元格，目前正在考虑。在体外，培养了这种胎儿肝细胞，肝脏真实细胞和非现实细胞，并正式靠近肝脏。 5）建立有效的细胞融合方法；与胎儿肝细胞，成熟的肝脏真实细胞和非固定性细胞使用激光融合细胞融合，将在形式和功能变化中进行更有效的融合。未来。 6）产生抗敏感性的核苷酸；一旦确定当前创建P-2水平的基因实验室，就会立即进行抗敏感性核苷酸。 7）引入抗 - 核苷酸;插入抗固定核苷酸的质粒，基因程度的评估，预防肝脏程度和能量产生程度等。研究是未来的任务。