顎顔面口腔領域の骨格筋量調節を目的とした新規医薬開発に関する研究

旨在调节颌面部和口腔区域骨骼肌质量的新药开发研究

基本信息

批准号：
19659541
负责人：
森山啓司
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659541/
关键词：
RNA干渉法マイオスタチン骨格筋

项目摘要

筋緊張低下を示す代表的な疾患である筋ジストロフィー患者では前歯部の重度の開咬を示すなど、口腔周囲筋の機能が顎顔面頭蓋の形態形成の一翼を担うと考えられている。すでに、我々は点突然変異を含むドミナントネガティブ型筋抑制遺伝子マイオスタチン(Myostatin: Mst)を過剰発現するトランスジェニックマウスにより咬筋や大腿二頭筋等の骨格筋量が約2倍増大することを報告した。さらに、Mstに特異的な合成二本鎖siRNA(Mst-siRNA)を構築し、20週齢のC57BL/6野生型雄性マウスの咬筋にアテロコラーゲンと混和したMst-siRNAを導入したところ、対照群と比較して顕著な骨格筋重量の増大、筋線維の肥大を認めたことを昨年度明らかにした。以上のことより、Mstに対するアテロコラーゲンを含んだsiRNAは個体レベルでの骨格筋量の調節に有用であると思われる。これらのことをふまえて、本年度は、筋組織の壊死を呈する筋ジストロフィー疾患モデルマウスmdx mouseの骨格筋に対するMst-siRNAの効果を検討することを目的とした。アテロコラーゲンと混和したMst-siRNAをmdx mouseの咬筋に導入したところ、野生型に対する効果と同様に骨格筋量の増加が認められ、またウェスタンブロット法によりMstの発現レベルが対照群と比較して抑制されているのが確認された。また、ラミニンα2抗体を用いた免疫染色により、筋線維の肥大が確認された。以上より、筋ジストロフィー疾患モデルマウスmdx mouseにおいても、Mstに対するRNAiは個体レベルでの骨格筋量の調節に有用であり、今後種々の筋疾患への治療に応用しうる可能性が示唆された。

肌营养不良症是一种导致肌肉张力减退的典型疾病，患者前牙表现出严重的开牙合，口周肌肉的功能被认为在颌面颅骨的形态发生中发挥作用。我们已经报道过，过度表达含有点突变的显性失活肌肉抑制基因（Mst）的转基因小鼠，其骨骼肌（如咬肌和股二头肌）的质量增加了约 2 倍。此外，我们构建了Mst特异性合成双链siRNA（Mst-siRNA），并将与去端肽胶原混合的Mst-siRNA导入20周龄C57BL/6野生型雄性小鼠的咬肌中。相比之下，观察到骨骼肌重量显着增加和肌纤维肥大。从上文看来，含有针对Mst的去端肽胶原的siRNA对于在个体水平上调节骨骼肌质量是有用的。基于这些发现，今年我们的目标是研究 Mst-siRNA 对 mdx 小鼠骨骼肌的影响，mdx 小鼠是一种表现出肌肉组织坏死的肌营养不良疾病模型小鼠。当将与去端肽胶原混合的Mst-siRNA引入mdx小鼠的咬肌时，观察到骨骼肌质量增加，与野生型的效果相似，并且Western blotting显示，与野生型小鼠相比，Mst的表达水平受到抑制。对照组已被确认。另外，通过使用层粘连蛋白α2抗体的免疫染色证实了肌纤维的肥大。上述结果表明，针对Mst的RNAi即使在肌营养不良疾病模型小鼠mdx小鼠中也可用于在个体水平上调节骨骼肌质量，并且将来可能应用于各种肌肉疾病的治疗。