RNAiを用いた顎口腔系の骨格筋量制御法の開発に関する研究

利用 RNAi 控制口颌系统骨骼肌质量的方法的开发研究

基本信息

批准号：
17659648
负责人：
森山啓司
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

咀嚼筋や舌筋の機能異常は、不正咬合の成因や矯正治療の予後の安定性に影響を与える。近年、細胞内の標的遺伝子の発現を特異的に抑制するRNA干渉法(RNA interference : RNAi)が開発され、臨床応用への展開が期待されている。本研究では、筋形成の新たな制御方法を開発することを目的として、骨格筋形成の抑制遺伝子であるマイオスタチン(Mst)を標的遺伝子としたRNAiがマウス筋芽細胞の増殖および分化に及ぼす影響を検討した。COS-1細胞で一過性に強制発現させたマイオスタチンはpSi-Mstをco-transfectionすることでその発現が顕著に抑制された。マイオスタチン恒常発現株では親株と比較して有意に細胞増殖能が低下していたが、pSi-Mstを導入すると細胞増殖能が有意に促進された。マイオスタチン恒常発現株における細胞増殖関連因子p21、p53およびpRbの発現に対するpSi-Mstの影響を検討した結果、p21、p53の発現上昇とpRbの発現低下が認められた。一方、pSi-Mstを導入したマイオスタチン恒常発現株では筋分化制御因子MyoD、myogeninおよびMHCの発現上昇と筋管形成を伴う筋分化促進が認められた。また、Mst-siRNAを混合したアテロコ・ラーゲンを導入したマウス咬筋において、導入から2週間後、対照群と比較してマイオスタチン発現が顕著に抑制されており、肉眼的にも明らかな骨格筋増大が観察された。Mst-siRNAを導入した咬筋および大腿二頭筋の重量は、いずれも有意な増加を示した。さらに、組織学的解析を行ったところ、Mst-siRNAを導入した咬筋の各筋線維は明らかな肥大傾向を示し、各筋線維の直径を測定・定量化した結果,対照群に比べて平均で約1.3倍増加していた。以上の結果から、マイオスタチンを標的としたRNAiは、筋芽細胞の増殖および分化を促進し、さらには個体レベルでの骨格筋量の調節に有用であり、今後骨格筋異常を伴う種々の疾患に対する非侵襲的かつ安全な治療として応用しうる可能性が示唆された。

咀嚼性和舌肌的免疫功能会影响牙合的原因以及正畸治疗预后的稳定性。最近，已经开发了RNA干扰（RNAi）来特异性抑制细胞中靶基因的表达，并有望为临床应用开发。在这项研究中，我们研究了靶向肌抑制素（MST）的RNAi（一种用于骨骼肌发生的抑制基因，对小鼠成肌细胞的增殖和分化）的影响，目的是开发一种控制肌发生的新方法。在COS-1细胞中瞬时强制表达的肌生抑素通过共转移PSI-MST被显着抑制。尽管与母体菌株相比，肌抑制素表达菌株的细胞增殖能力显着降低，但PSI-MST引入了显着增强的细胞增殖能力。 PSI-MST对细胞增殖相关因子p21，p53和PRB在肌抑制素稳态表达菌株中的影响表明，p21和p53的表达增加，PRB表达降低。另一方面，在引入psi-mst的肌抑制蛋白表达的菌株中，肌肉分化调节剂myod，肌蛋白和MHC的表达以及促进肌肉分化并伴随着肌管结构。此外，与对照组相比，与AteLocol Lagen与MST-SIRNA混合的小鼠咬合肌肉中，肌抑制素的表达受到了显着抑制，并且观察到骨骼肌的生长被明显可见。 MST-SIRNA引入的咬肌和股二头肌均显示出显着增加。此外，组织学分析表明，用MST-SIRNA引入的咬肌中的每种肌肉纤维都显示出明显的肥大趋势，并且对每个肌肉纤维的直径进行了测量和定量，平均而言，平均增加了约1.3倍。上述结果表明，靶向肌抑制蛋白的RNAi促进肌生抑制素的增殖和分化，对于调节个体水平的骨骼肌质量很有用，将来可以作为对与骨骼肌异常相关的各种疾病的非侵入性和安全治疗。

项目成果

期刊论文数量（8）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Expression of macrophage inflammatory protein-1 alpha(MIP-lalpha) in the periodontal tissue during experimental tooth movement.

实验性牙齿移动过程中牙周组织中巨噬细胞炎症蛋白-1α（MIP-lα）的表达。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Dentistry in Japan 42
影响因子：
0
作者：
K Nakaya;HD Yamagata;N Arita;K-i Nakashiro;M Nose;T Miki;H Hamakawa;Odani T et al.;小谷岳志他;磯辺友秀他;Shioyasono Atsushi
通讯作者：
Shioyasono Atsushi

Malignant B-lymphoid cells with bone lesions express receptor activator of nuclear factor-kappaB ligand and vascular endothelial growth factor to enhance osteoclastogenesis.

骨病变的恶性B淋巴细胞表达核因子-κB配体的受体激活剂和血管内皮生长因子，以增强破骨细胞生成。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Clin Cancer Res 11・17
影响因子：
0
作者：
Matsumoto;T;Abe M;Matsumoto T;Matsumoto T;Kawai S;Oshima T;Shibata H
通讯作者：
Shibata H

MIP-1alpha utilizes both CCR1 and CCR5 to induce osteoclast formation and increase adhesion of myeloma cells to marrow stromal cells.

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Experimental hematology
影响因子：
2.6
作者：
Y. Oba;Jun Won Lee;Lori A. Ehrlich;H. Chung;D. Jelinek;N. Callander;R. Horuk;S. J. Choi;G. Roodman
通讯作者：
Y. Oba;Jun Won Lee;Lori A. Ehrlich;H. Chung;D. Jelinek;N. Callander;R. Horuk;S. J. Choi;G. Roodman

線維芽細胞増殖因子受容体2(FGFR2)

成纤维细胞生长因子受体 2 (FGFR2)

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
生体の科学 56巻5号
影响因子：
0
作者：
H Ioi et al.;谷本起穂;松本和也;森山啓司
通讯作者：
森山啓司

Identification of genes related to mechanical stress in humar periodontal ligament cells using microarray analysis

使用微阵列分析鉴定与人体牙周膜细胞机械应力相关的基因

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
J Periodontal Res 42(1)
影响因子：
0
作者：
K Nakaya;HD Yamagata;N Arita;K-i Nakashiro;M Nose;T Miki;H Hamakawa;Odani T et al.;小谷岳志他;磯辺友秀他;Shioyasono Atsushi;Shinji Fujihara;Santos de Araujo Rui Mauricio
通讯作者：
Santos de Araujo Rui Mauricio