リンパ濾胞破壊脾組織骨格への肝幹細胞・サイトカイン産生細胞移植による異所性肝作製

通过将肝干细胞和细胞因子产生细胞移植到淋巴滤泡破坏的脾组织骨架中来产生异位肝脏

基本信息

批准号：
18659396
负责人：
藤元治朗
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Hyogo College of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659396/
关键词：
肝臓幹細胞サイトカイン異所性肝

项目摘要

免疫・分子生物学的手法により脾臓を補助肝臓およびサイトカイン・増殖因子産生工場として作り変えることを目指し研究を行なっている。C57/BL/6マウスに抗CD20抗体20μgおよびCD4抗体25μgを腹腔内投与しB cell zoneであるLynphoid follicle、T cell zoneであるPeriarteriolar lymphoid shathを破壊し脾臓に移殖肝細胞が生着する環境を作成した。CD4PE抗体、CD19PE抗体、B220PE抗体によるFACS解析において、抗CD4抗体、抗CD20抗体投与によって脾臓B cell zoneおよびT cell zoneの破壊を確認しておいた。移殖肝細胞はC57/BL/6マウスをドナーとし肝臓よりコラゲナーゼ灌流法にて肝細胞を分離し、上記前処置を行ったレシピエントマウスを小開腹し脾臓を露出、肝細胞1-4×10^6個を下極より26ゲージ針を用い注入し移殖した。肝細胞移殖後1週間目にレシピエント脾臓を摘出し肝細胞の生着を評価した。PAS染色においてレシピエント脾臓内にわずかではあるがPAS陽性の肝細胞の存在を確認し生着を確認することができた。移殖後1週間の時点で移殖肝細胞が生着していることを確認できたが、今後更に工夫を重ね生着率を高め長期間での肝細胞の生着の評価、肝細胞機能評価を行い、薬剤誘導性障害肝モデルへの移殖へ移行する予定である。

我们正在进行研究，以通过免疫和分子生物学方法来重建脾脏作为辅助肝脏和细胞因子 /增殖工厂生产厂。 C57/BL/6抗-cd20抗体和CD4抗体25μg在腹腔中施用，lynphoid卵泡，T -cell带，破坏了脾脏的脾脏。在使用CD4PE抗体，CD19PE抗体和B220PE抗体的FACS分析中，抗-CD4抗体，抗-CD20抗体给药证实了脾B细胞区和T细胞区域的破坏。为了迁移肝细胞，C57/BL/6小鼠是供体，肝细胞与肝脏与肝脏分离，肝脏的食谱中的食谱均进行上述倾泻，暴露于脾脏，暴露了脾×××10^6。肝细胞转移一周后，去除受体脾脏并评估肝细胞。在PAS染色中，有可能确认存在PAS阳性肝细胞的存在，尽管在受体脾脏中，并确认了磨损。已经确认过渡肝细胞在过渡后一周佩戴，但是长期肝细胞功能中的生命比增加了，将来会评估并将其转移到肝细胞功能。药物诱导的肝模型。