水素の動きを制御することにより阻血再灌流障害のシグナルを制御する試み

尝试通过控制氢运动来控制缺血再灌注损伤的信号

• 批准号: 18659376
• 负责人: 深井 原
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18659376/
• 关键词: 重水; 臓器保存; 冷保存; 冷保存再灌流; 嫌気代謝; 細胞骨格; 肝

新規保存液の1)-3)に対する細胞保護効果が明らかになった。1)肝細胞株AML12の低温(4℃)曝露による傷害、2)低温・低酸素による傷害、3)低温・低酸素/復温・再酸素化よる傷害。上記1〜3)でアポトーシスが時間依存的に進行したが、新規保存液によって著明に軽減された。また、4)同様の著明な細胞保護効果が小腸上皮細胞、気管上皮細胞でも認められた。膵頭細胞では他の細胞と比較すると保護効果がやや低かった。5)低温下での肝細胞株のグルコースの取り込みを有意に促進した。6)肝細胞株、小腸細胞株に過酸化水素(0.5M)を負荷すると、従来の保存液では数秒で細胞内Ca2+が急激に濃度上昇したが、新規保存液ではこれを完全に阻害することに成功した。すなわち、ストレスによる小胞体からのCa2+放出が完全に阻害された。このような、画期的な作用を呈する新規保存液の基本的な組成を決定したことが、本実験の大きな成果である。さらに、本保存液を用いた肝冷保存によって幾つかのタンパクのリン酸化が維持されていることが分かった。また、生存シグナルを強化するいくつかのキナーゼや、アクチンの脱重合・重合に関与するタンパク、NO産生酵素など、細胞保護作用の原因と考え得る興味深い変化を発見した。また、従来冷保存での変化や、肝で発現することすらもほとんど報告されておらず、肝での機能は全く不明なタンパクが、本保存液で誘導されていることも発見した。

阐明了新保存液对1)-3)的细胞保护作用。 1）肝细胞系AML12暴露于低温（4℃）造成的损伤，2）低温/缺氧造成的损伤，3）低温/缺氧/复温/复氧造成的损伤。在上述1至3)中，细胞凋亡以时间依赖性方式进行，但新的保存液显着减少了细胞凋亡。此外，4）在小肠上皮细胞和气管上皮细胞中也观察到类似的显着细胞保护作用。胰头细胞的保护作用略低于其他细胞。 5)低温下显着促进肝细胞系对葡萄糖的摄取。 6）当将过氧化氢（0.5M）加载到肝细胞系和小肠细胞系中时，传统保存液中细胞内Ca2+浓度在几秒钟内迅速上升，但新保存液成功地完全抑制了这种情况。 。换句话说，应激诱导的内质网 Ca2+ 释放被完全抑制。该实验的主要结果是确定了一种具有突破性效果的新型保存液的基本成分。此外，发现通过使用该保存液冷藏肝脏，可以维持多种蛋白质的磷酸化。他们还发现了可能导致细胞保护作用的有趣变化，包括几种增强生存信号的激酶、参与肌动蛋白解聚和聚合的蛋白质以及产生 NO 的酶。我们还发现，这种保存液会诱导一种蛋白质，其在肝脏中的功能完全未知，因为很少有关于冷藏过程中变化甚至在肝脏中表达的报道。