ヒストン脱アセチル化阻害による関節リウマチの炎症および骨・軟骨破壊の抑制法の開発

开发一种通过抑制组蛋白脱乙酰化来抑制类风湿性关节炎炎症和骨/软骨破坏的方法

基本信息

批准号：
17659470
负责人：
西田圭一郎
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

【研究成果1】血管新生抑制は、関節リウマチ(以下RA)治療のターゲットである。我々は血管新生促進作用があると言われるヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)1に注目し、低酸素下にRA滑膜線描芽細胞を培養し、HDAC阻害剤であるFK228を加え、それに対するHIF-1αとVEGFの発現の効果を調べた。【方法】1)HDAC1のRA滑膜組織における免疫染色,2)RASFにおいて低酸素、あるいは炎症性サイトカインによって誘導されるHIF-1αとVEGFの発現、およびそれらに与えるHDAC阻害剤FK228の効果の検討、3)コラーゲン関節炎モデル(CAIA)マウス発症6日目におけるFK228(2.5mg/kg)全身投与後のVEGFの発現量の検討を行った。【結果】HADC1はRA滑膜組戦中で表層細胞、血管内皮細胞、浸潤リンパ球に発現していた。また、FK228は、低酸素によって誘導されるHDAC1発現を抑制した。RASFにおいてFK228はHIF-1αとVEGFの発現をmRNAおよび蛋白レベルで有意に抑制した。CAIAマウスにおいてFK228投与により有意に滑膜組織中VEGF発現量が低下した。【結論】RA滑膜においてHDAC阻害剤は、低酸素によって誘導されるHIF-1αとVEGFの発現を阻害し、血管新生を抑制する。【研究成果2】HDAC阻害剤であるTrichostatin A(TSA)の滑膜炎および軟骨破壊に対する効果を検討した。【方法】6週齢DBA/1マウスを用いて,抗II型コラーゲン抗体カクテルおよびリポ多糖投与による関節炎モデルマウスを作成した。関節炎発症後,4-14日目に0.5,1.0,2.0mg/kgのTSAを連日皮下注射し,臨床的関節炎スコア,体重変化を評価した。また,14日目に採取した後肢においてSanchoらの組織学的関節炎スコア,およびKamekuraらの軟骨損傷スコアによる評価を行った。【結果】臨床的関節炎スコア,組織学的関節炎・軟骨損傷スコアいずれにおいてもコントロール群に比しTSA群で有意に抑制されていた。また、MMP-3、-13の発現はTSA群でいずれも抑制され、TIMP-1発現は亢進していた。【考察】TSAは最も研究されているHDAC阻害剤の一つであるが,関節炎に対する全身投与の効果を検討した報告は無い。本研究結果から用量依存性にTSAが滑膜炎および軟骨破壊を抑制することが判明した。

[研究结果1]抑制血管生成是治疗类风湿关节炎（RA）关节炎的靶标。我们专注于组蛋白脱乙酰基酶（HDAC）1，据说具有血管生成促进作用，在缺氧下培养的RA滑膜线爆炸添加了HDAC抑制剂FK228，并研究了HIF-1α和VEGF表达的作用。方法：1）HDAC1在RA滑膜组织中的免疫染色，2）检查RASF中缺氧或炎症细胞因子诱导的HIF-1α和VEGF的表达，HDAC抑制剂FK228对它们的影响，以及3）对FK22的系统的表达水平（2.5 MG）的表达水平（2）研究了胶原关节炎模型（CAIA）小鼠。结果：HADC1在RA滑膜组战斗中在浅表细胞，血管内皮细胞和浸润淋巴细胞中表达。 FK228还抑制了缺氧诱导的HDAC1表达。 FK228在RASF中显着抑制了在mRNA和蛋白水平上HIF-1α和VEGF的表达。在CAIA小鼠中，FK228的给药可显着降低滑膜组织中VEGF表达的量。 [结论] HDAC抑制剂抑制缺氧诱导的HIF-1α和VEGF的表达，从而抑制血管生成。 [研究结果2]研究了HDAC抑制剂Trichostatin A（TSA）对滑膜炎和软骨破坏的影响。方法：使用抗类型II胶原蛋白抗体鸡尾酒和脂多糖给药的6周龄的DBA/1小鼠制备模型关节炎小鼠。关节炎发作后，每天在第4-14天皮下皮下注射0.5、1.0和2.0 mg/kg TSA，以评估临床关节炎评分和体重的变化。此外，使用Sancho等人的组织学关节炎评分评估了在第14天收集的后肢。 Kamekura等人的软骨损伤得分。 [结果]与对照组相比，TSA组的临床关节炎评分和组织学关节炎和软骨损伤评分都受到了显着抑制。此外，在TSA组中抑制了MMP-3和-13的表达，而TIMP-1的表达增加了。 [讨论] TSA是研究最多的HDAC抑制剂之一，但没有研究系统给药对关节炎的影响。这项研究的结果表明，TSA以剂量依赖性方式抑制滑膜炎和软骨破坏。