新規糸球体特異的糖質ステロイド受容体コファクターの同定と機能解析

新型肾小球特异性糖类固醇受体辅因子的鉴定和功能分析

基本信息

批准号：
17659253
负责人：
山本格
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

免疫組織化学法で糸球体上皮細胞(ポドサイト)に糖質ステロイド受容体が存在することを、糖質ステロイド受容体に対する特異抗体(H8031)を用いて見出した。ポドサイトを直接傷害することが示されているピューロマイシンアミノヌクレオシド(PAN)をラットに静脈注射するとヒトのネフローゼ症候群と同様の病態を惹起することができ、ヒト微小変化型ネフローゼ症候群のモデルとして広く使われている。このモデルはヒト微小変化型ネフローゼ症候群と同様に糖質ステロイド投与で蛋白尿が抑制された。これらのことはポドサイトには糖質ステロイド受容体が存在し、糖質ステロイドがその受容体に結合し、その結合が蛋白尿の原因となるスリット膜の傷害などを回復させると考えられた。ラット糸球体から可溶化タンパク質を抽出し、抗糖質ステロイド受容体抗体で免疫沈降反応を行い、SDS-PAGEで確認された糖質ステロイド受容体と共に共沈するタンパク質を糖質ステロイド受容体のコファクター候補分子と推定した。コファクター候補分子として検出された分子は分子量が約120、100、60kDaの分子で、質量分析計でそれらの分子の同定を試みたところ、corticotropin-releasing factor binding proteinなど数種類の分子の候補分子が同定された。corticotropin-releasing factor binding protein遺伝子は糸球体に発現が強く、その発現部位はポドサイトであることがIn situ hybridization法で確認した。

根据免疫组织法律，发现使用特殊抗体（H8031）用于糖类固醇受体，糖类固醇受体在肾小球上皮细胞（Podsite）中存在。紫杉醇氨基核苷（PAN）被证明在POD部位受伤，可能会引起与人类肾病综合征相同的病理状况，并将其用作人类微观肾病综合征的模型。在该模型中，蛋白尿被碳水化合物类固醇（如人类微观肾病综合征）抑制。这些被认为在豆荚部位中具有碳水化合物类固醇受体，碳水化合物类固醇将其与受体结合，从而恢复了导致蛋白尿的缝隙膜的损伤。从大鼠肾小球中提取静音蛋白，抗糖类固醇受体抗体具有免疫反应，并用SDS-PAGE确认的糖类固醇受体下沉的蛋白质是糖类固醇受体。被检测为棺材候选分子的分子约为120、100、60kDa分子，当试图用质谱仪的分子分子试图鉴定分子分子时，几种类型的分子，例如皮质激素 - 释放因子因子结合蛋白，具有多种类型的结合蛋白分子。皮质激素释放因子结合蛋白基因在肾小球中强烈表达，索引位点是POD位点。

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Localization of tyrosine-phosphorylated proteins in normal rat kidney

正常大鼠肾脏中酪氨酸磷酸化蛋白的定位

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Acta Med. Biol 55
影响因子：
0
作者：
Kosugi;R.;Shioi;T.;Watanabe-Maeda;K.;Yoshida;Y.;Takahashi;K.;Machida;Y.;Izumi;T;Harald Mischak;Zhang Ying
通讯作者：
Zhang Ying

Role of Fat1 in cell-cell contact formation of podocytes in puromycin aminonucleoside nephrosis and neonatal kidney

Fat1在嘌呤霉素氨基核苷肾病和新生儿肾足细胞接触形成中的作用