偽膜性大腸炎モデルの作製とその病態生理の解析

伪膜性结肠炎模型的建立及其病理生理学分析

基本信息

批准号：
17659199
负责人：
近藤稔和
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Wakayama Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

偽膜性大腸炎は,抗生物質の投与によって腸内細菌叢の菌交代現象が起こり,このうちクロストリディウム・ディフィシル(Clostridium difficile)が増殖した結果として起こる,重篤な大腸炎です。平成17年度では,偽膜性大腸炎の動物モデルを確立した.本年度は,フラクタルカインレセプター遺伝子欠損マウス(CX3CR1 KO)を用いて,偽膜性大腸炎の病態形成におけるIFN-γの役割を解析した.偽膜性大腸炎実験モデル1)実験動物としてIFN-γKOおよび野生型マウスを用い,麻酔下で開腹し,長さ4cmの腸管ループ内にC.difficileの毒素(トキシンA)を200ng/0.2ml注入し、1,2,4時間後に実験動物を屠殺して腸管ループを採取すると、野生型マウスでは毒素を投与して腸管ループでは、水分の吸収が抑制されていたが,CX3CR1 KOマウスでは水分吸収は抑制されていなかった。2)ヘマトキシリンーエオジン染色で病理組織学的解析を行ったところ、野生型マウスでは毒素を投与したループの腸の正常組織構造は、破壊され出血及び好中球を主体とする白血球浸潤が著明であった,しかしながら,CX3CR1 KOマウスではこれらの病理組織学的所見が有意に軽減していた.3)サイトカインやケモカインの遺伝子発現を検討したところ、野生型マウスでは腫瘍壊死因子(TNF-α)、マクロファージ炎症性タンパクー1(MIP-1),MIP-2,KCの遺伝子発現が著明に増強してたが,CX3CR1 KOマウスではこれらの遺伝子発現が減弱していた。以上、C.difficileトキシンAによる腸炎のモデルではCX3CR1を介したシグナルが増悪因子であることが判明した.

假膜性结肠炎是一种严重的结肠炎，当艰难梭菌的生长（当抗生素被施用时）导致，导致肠道菌群中的细菌现象交替，艰难梭菌。 2005年，建立了假膜结肠炎的动物模型。今年，我们使用分子受体基因缺陷型小鼠（CX3CR1 KO）分析了IFN-γ在假膜结肠炎发病机理中的作用。假膜性结肠炎实验模型1）使用IFN-γKO和野生型小鼠作为实验动物，在麻醉下打开剖腹手术，将200 ng/0.2 ng/0.2 ml的艰难梭菌毒素（毒素A）注入4 cm长的肠子长。 1，2，4小时后，处死实验动物并收集肠环。毒素在野生型小鼠中施用，并在肠环中抑制吸水，而在CX3CR1 KO小鼠中未抑制吸水。 2）使用苏木精 - 欧洲蛋白染色进行组织病理学分析。在野生型小鼠中，对毒素的肠环的正常组织结构被破坏，出血和基于中性粒细胞的白细胞浸润。但是，在CX3CR1 KO小鼠中，这些组织病理学发现显着降低。 3）当检查细胞因子和趋化因子的基因表达时，肿瘤坏死因子（TNF-α）的基因表达，巨噬细胞炎性蛋白1（MIP-1），MIP-1和KC的基因表达显着增加了野生型小鼠的小鼠，而这些基因在CX3CR1 KO小鼠中的表达衰减。这表明CX3CR1介导的信号是由艰难梭菌毒素A引起的肠炎模型的恶化因子。