アデノウイルスベクターを用いた嗅覚障害に対する遺伝子治療

使用腺病毒载体治疗嗅觉障碍的基因疗法

基本信息

批准号：
16659466
负责人：
丹生健一
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659466/
关键词：
嗅神経再生医療アデノウイルスベクター LacZ bcl-2 olfactory epithelium adenoviral vector BDNF GDNF NGF

项目摘要

背景:現在、嗅覚障害は一般にステロイド剤の局所投与を中心として治療がなされているが、その作用機序は未だ明らかではなく、感冒罹患後や外傷など嗅上皮より中枢の軸索や嗅球の障害が原因と考えられる嗅覚障害や、加齢に伴う嗅覚障害に対しては有効な治療法はない。本研究は「神経栄養因子の遺伝子を組み込んだアデノウイルスベクターによる新たな嗅覚障害の治療法開発」を目指して計画された。方法:BDNF遺伝子またはGDNF遺伝子を組み込んだアデノウイルスベクターを鼻腔よりマウス嗅上皮へ投与し、1〜4週間後にマウス鼻腔ならびに嗅球を一塊に採取。嗅神経細胞における各遺伝子の発現を遺伝子産生蛋白に対する免疫染色により確認した。更に、アデノウイルスベクター投与後1週間後に嗅球除去によるアポトーシスを誘発し、嗅神経細胞に発現させたDNFまたはGDNFにより、嗅神経細胞のアポトーシスを抑制することが可能か否か検討した。結果:BDNFまたはGDNFの発現はアデノウイルスベクター投与数日後から嗅上皮内に確認された。しかしながら嗅球除去モデルでは嗅神経細胞のアポトーシス抑制効果はみられなかった。考察:アデノウイルスベクターに神経栄養因子の遺伝子を組み込むことにより、目的の遺伝子を嗅神経細胞に発現させることに成功した。しかしながら、今回用いたモデルで嗅神経細胞のアポトーシスを回避することはできなかった。嗅神経細胞の維持には他の神経栄養因子も関与している可能性があり、更なる研究が必要である。

Background: Currently, olfactory disorders are generally treated mainly by local administration of steroids, but the mechanism of action is not yet clear, and there is no effective treatment for olfactory disorders that are thought to be caused by disorders of the central axons and olfactory bulbs rather than the olfactory epithelium, such as after cold disease or trauma, or for age-related olfactory disorders.这项研究的计划是为了“使用结合神经营养因子基因的腺病毒载体开发新的嗅觉疾病治疗方法”。方法：通过鼻腔对小鼠的嗅觉上皮施用掺入BDNF基因或GDNF基因的腺病毒载体，并在1-4周后，将小鼠鼻腔和嗅球收集到单个肿块中。通过对产生基因的蛋白进行免疫染色来证实每个基因在嗅觉神经元中的表达。此外，还研究了在给药腺病毒载体后一周引起的嗅球去除引起的凋亡是否可以诱导，以及在嗅觉神经元中表达的DNF或GDNF是否可以抑制嗅觉神经元的凋亡。结果：腺病毒载体几天后几天证实了BDNF或GDNF的表达。但是，嗅球去除模型没有显示嗅觉神经元的抑制作用。讨论：通过将神经营养因子基因纳入腺病毒载体，我们成功地表达了嗅觉神经元感兴趣的基因。但是，这次使用的模型无法避免嗅觉神经元凋亡。其他神经营养因素也可能参与嗅觉神经元的维持，并且需要进一步研究。