磁気ビーズを用いた新しい血管新生阻害療法の開発

使用磁珠开发新的抗血管生成疗法

• 批准号: 16659331
• 负责人: 石神 浩徳
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659331/
• 关键词: 血管内皮細胞; Dynabeads; 磁気パルス刺激

ヒト臍帯由来血管内皮細胞(HUVEC)に磁性ビーズとして、Dynabeads Pan Mouse IgG(直径4.5±0.2μm)とDynabeads Protein G(直径2.8±0.2μm)を結合させてその細胞破壊効果をIn Vitroにて検討した。抗CD31抗体と磁性ビーズを結合させた後に、HUVECと抗CEA抗体-磁性ビーズの複合体を抗原抗体反応により結合させた。細胞・磁性ビーズ複合体を分離し、チューブに懸濁、チューブの底に永久磁石を置くことにより細胞-磁性ビーズ複合体を凝集させた。パルス磁気刺激用の円形コイルの中心にチューブを置き刺激、5秒おきに20回の刺激を行い、細胞の生存率を計測した。走査型電子顕微鏡による形態の変化もあわせて観察した。パルス磁気刺激を受けた細胞生存率はコントロール群と比較し有意に減少した(コントロール群:刺激群;99%:45.3±14.0%(Pan Mouse IgG)、99%:34.7±9.2%)。また、走査電子顕微鏡では、細胞膜を引きちぎることにより細胞傷害をもたらしていることが観察され、がん細胞で認められた所見と一致していた。腫瘍血管に特異的に発現する抗原を標的として磁性ビーズの結合とパルス磁気刺激による新しい血管新生阻害療法に応用できる可能性が示唆された。

将Dynabeads Pan Mouse IgG（直径4.5±0.2μm）和Dynabeads Protein G（直径2.8±0.2μm）作为磁珠与人脐带源性血管内皮细胞（HUVEC）结合，并在体外检查其细胞破坏效果。做过。抗CD31抗体与磁珠结合后，HUVEC与抗CEA抗体-磁珠复合物通过抗原抗体反应结合。将细胞-磁珠复合物分离，悬浮在管中，并将永磁体放置在管底部以使细胞-磁珠复合物聚集。将管子置于圆形线圈的中心进行脉冲磁刺激，每5秒刺激20次以测量细胞存活率。还使用扫描电子显微镜观察形态变化。脉冲磁刺激后的细胞存活率较对照组显着降低（对照组：刺激组；99%：45.3±14.0%（Pan Mouse IgG），99%：34.7±9.2%）。此外，扫描电子显微镜显示这些细胞通过撕裂细胞膜造成细胞损伤，这与在癌细胞中观察到的结果一致。结果表明，通过将磁珠和脉冲磁刺激结合到肿瘤血管中特异性表达的靶抗原，有可能将该方法应用于新的血管生成抑制疗法。