微生物の共生関係を巧みに利用した嫌気共生培養による未知環境微生物の分離手法の確立

巧妙利用微生物之间的共生关系，建立通过厌氧共生培养分离未知环境微生物的方法

• 批准号: 16658036
• 负责人: 井町 寛之
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Nagaoka University of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16658036/
• 关键词: メタン生成古細菌; 水素分圧; 嫌気共生培養; 16S rRNA遺伝子

我々は低分圧の水素をゆっくりと連続的に供給可能な方法として嫌気共生培養系に着目し、様々な嫌気環境中から未培養系統分類群に属する新規なメタン生成古細菌の分離・培養を試みた。その結果、水田土壌を植種源に用いたプロピオン酸培養系内から、分類学上目レベルで新規なメタン生成古細菌SANAE株を分離することに成功した。分離株の菌学的特徴を決定したところ、SANAE株は運動性のない桿菌であり、その細胞サイズは幅0.3-0.6μm、長さは1.8-2.8μmであった。また、DNAのG+C含量は56.6%であった。水素およびギ酸を基質として利用可能であり、その生育には酢酸を要求した。至適生育温度は37℃、至適生育pHは7であり、至適生育条件下での倍加時間は4.2日であった。16S rRNA遺伝子のほぼ全長を決定し分子系統解析を行った結果、本分離株は、今まで未培養なメタン生成古細菌のグループとして認識されていたRice Cluster Iに属する目レベルで新規なメタン生成古細菌であることが明らかとなった。Rice Cluster Iに属するメタン生成古細菌は、様々な水田環境中に普遍的かつ優占的に存在し水田環境中からのメタン生成に大きく寄与していることが示唆されており、環境問題を考える上でも本菌株の分離は非常に重要な知見であるといえる。我々は以上の結果を踏まえ、本分離株をMethanomicrobia綱に属する新目を代表する新属新種のメタン生成古細菌として提案する予定である。

我们将厌氧共生培养系统作为一种可以缓慢而连续提供低尺寸的方法，而分离和培养的新甲烷生成的细菌属于联合国文化分类组，我尝试了各种厌氧环境。结果，我们成功地将新的甲烷生产的细菌sanae股与丙酸培养系统分离出来，丙酸培养系统在分类​​水平上使用了稻田作为种植源。当确定分离量的细菌特征时，SANAE菌株是一种非运动杆菌，其细胞大小为0.3-0.6μm，长度为1.8-2.8μm。 DNA G+C含量为56.6％。氢和星酸作为底物可用，并需要生长乙酸。最佳生长温度为37°C，最佳生长pH值为7，在过度生长条件下的双倍时间为4.2天。由于确定了几乎16S rRNA基因的整体长度和进行分子系统分析，分离库存属于水稻簇I，该簇被认为是一组未培养的甲烷产生的细菌和新的甲烷产生。据透露，这是一种旧细菌。有人建议，属于水稻簇I的细菌在各种帕迪领域都占主导地位，并大大促进了甲烷的产生，并考虑了菌株的分离也是一个非常重要的知识。基于上述结果，我们计划将这种分离提出为一种新属甲烷属的细菌，代表属于甲烷细胞绳的新眼睛。

项目成果

水素濃度をコントロールしてメタン生成古細菌を分離する-嫌気共生培養系を用いた新規分離培養法-

通过控制氢气浓度分离产甲烷古菌 - 利用厌氧共生培养系统的新分离培养方法 -

• 发表时间: 2005
• 期刊: 極限微生物学会誌 4(印刷中)
• 作者: 井町寛之;酒井早苗
• 通讯作者: 酒井早苗