潜在性ウイルスDNAを指標としたスポーツ選手の感染症罹患リスク把握の試み

尝试以潜伏病毒DNA为指标来了解运动员感染传染病的风险

• 批准号: 16650156
• 负责人: 河野 一郎
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16650156/
• 关键词: URTI; EBV; sports; saliva; SIgA; athletes

【目的】唾液中Epstein-Barr Virus (EBV) -DNAが運動に伴う防衛体力・コンディションを示す指標となりうるかを明らかにするために,高強度運動時における唾液中からのEBV-DNAの検出方法について検討し,検量線を用いてその発現量を定量化した.【方法】自転車エルゴメータを用いた一過性の高強度運動の前後に採取した唾液から,ChargeSwitch(Invitrogen社)を用いてDNA抽出を行った.抽出されたDNAを鋳型として,EBV-DNAを特異的に認識するプライマーを用いたPCRにより,EBV-DNAを検出した.既知の濃度であるEBV-DNA挿入ベクターを用い検量線を作成した.検量線を基準とし,唾液より検出したEBV-DNA発現量を定量化した.また,その他の免疫学的指標として広く用いられている唾液中のSIgA分泌速度をELISAを用いて測定した.血清中のEBVに対する抗体検査を実施し,対象者の感染既往の有無を調べた結果,全員が陽性であった.【結果】唾液中EBV-DNA発現量を,既知の濃度であるEBV-DNA挿入ベクターを用いた検量線を基準とすることにより,定量化することが可能となった.唾液中EBV-DNA発現量は,高強度運動によって変動したSIgA分泌速度は,高強度運動により減少した.EBV-DNA発現量とSIgA分泌速度の変動については,相関は認められなかった.【結論】EBV-DNA挿入ベクターを基準にした唾液中EBV-DNA発現量の定量化は有効であった.この検出系を用いることにより,唾液中EBV-DNA発現量を評価することが可能となった.唾液中EBV-DNA発現量は,一過性の高強度運動によって変化した.EBV-DNA発現量,およびSIgA分泌速度と上記道感染症の関係性については,長期的なモニタリングを含め,さらなる検討が必要である.

[目的]唾液中的爱泼斯坦 - 巴尔病毒（EBV） - 阐明DNA是否可以指示与运动有关的防御身体适应性和状况，我们研究了一种在高强度运动过程中检测唾液中EBV-DNA的方法，并使用校准曲线量化了其表达水平。 [方法]使用自行车测量计在瞬时高强度运动前后收集的唾液中提取DNA（Invitrogen）。提取的DNA用作模板和模板。使用专门识别EBV-DNA的引物通过PCR检测EBV-DNA。使用已知浓度的EBV-DNA插入载体创建校准曲线。基于校准曲线，定量了从唾液中检测到的EBV-DNA表达水平。此外，使用ELISA测量了唾液中SIGA分泌的速率，被广泛用作免疫指标。对血清中的EBV进行了抗体测试，受试者的结果表明，所有感染史都是阳性的。 [结果]可以使用已知的EBV-DNA插入载体使用校准曲线来量化唾液中EBV-DNA表达的量。通过高强度运动减少了唾液中EBV-DNA表达的量。 EBV-DNA表达的量与SIGA分泌速率之间没有观察到相关性。 [结论]基于EBV-DNA插入载体的唾液中EBV-DNA表达水平的定量是有效的。使用此检测系统，可以评估唾液中EBV-DNA的表达水平。唾液中EBV-DNA的表达水平通过短暂的高强度运动改变。需要进一步考虑，包括长期监测，即EBV-DNA的表达水平与SIGA分泌速率与上述道感染之间的关系。