神経機能を制御するペルオキシソームタンパク質の同定と機能解析

控制神经功能的过氧化物酶体蛋白的鉴定和功能分析

基本信息

  • 批准号:
    13878123
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.22万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2001
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2001 至 2002
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

神経細胞を制御するペルオキシソームタンパク質について理解する上で,ペルオキシソームが神経細胞のどのような部分にどのような状態で存在するのか明らかにする必要がある。これまでに培養神経細胞PC12D細胞の神経突起中にペルオキシソームが多数存在し,さらにその先端である成長円錐にも存在することを報告している。その過程で,PC12D細胞の神経突起中にはペルオキシソームとマイクロペルオキシソームの二種類が存在することがわかった。これまで,軸索中にマイクロペルオキシソームが存在することは報告されていたが,ペルオキシソームが存在することは知られていなかった。ペルオキシソームとマイクロペルオキシソームの二つが神経突起中に存在することには意義があるのではないかと考え,それらの移動に関する解析を行った。その結果,順方向と逆方向にいずれもが移動することがわかった。全部で3131個について3秒ごとに3分間測定した結果,ペルオキシソームが164個(順方向91個,逆方向73個),マイクロペルオキシソームが239個(順方向108個,逆方向131個)移動していた。それぞれの平均速度の平均は0.230μ/secから0.268μ/sec,ピーク速度の平均は0.329μ/secから0.389μ/sec,移動距離の平均は2.92μから3.50μの間にあり,順方向と逆方向,ペルオキシソームとマクロペルオキシソームとの間で特に大きな違いはなかった。移動したペルオキシソームは3分間で約13%であり,移動度はそれほど高くないようである。ペルオキシソームとマイクロペルオキシソームに移動度の違いはみられなかったが,機能分担をしていると考えられるため,やはり神経系で特異的に機能するペルオキシソームタンパク質の解析が必須である。以上の結果については,投稿準備中である。また,線虫の機能未知推定ペルオキシソームタンパク質の遺伝子解析については,クローニングを行い発現解析を行っているところである。
要了解调节神经元的过氧化物酶体蛋白,有必要阐明神经元的哪些部位以及在哪些状态中存在过氧化物酶体。据报道,培养的神经元PC12D细胞的神经突中存在许多过氧化物酶体,并且它们也存在于生长锥中,其尖端是生长锥。在此过程中,发现PC12D细胞的神经突中有两种类型的过氧化物酶体和微氧化酶体。到目前为止,据报道,轴突中存在微氧酶体,但尚不知道过氧化物酶体存在。我们认为,重要的是在神经突中存在两个过氧化物酶体和微氧化酶体,并分析其迁移。结果,发现向前和反向方向都移动了。每3秒钟总共测量3,131例3分钟,而164个过氧化物酶体(91个正向和73个反向)和239个微氧化酶体(108个正向和131个反向)。每个平均速度的平均值在0.230μ/秒至0.268μ/sec之间,峰值速度的平均值在0.329μ/sec和0.389μ/sec之间,平均行程距离的平均距离在2.92μ和3.50μ之间,并且前进方向和反向方向和过氧化粒之间没有特别的显着差异。迁移的过氧化物酶体在3分钟内约为13%,迁移率似乎不高。尽管过氧化物酶体和微氧酶体之间的迁移率没有差异,但据信该功能被划分了,因此对过氧化物酶体蛋白的分析,这些蛋白(专门在神经系统中起作用)至关重要。目前正在准备上述结果进行提交。此外,对线虫的过氧化物酶体蛋白的基因分析,通过克隆和表达分析进行了未知功能。

项目成果

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