癌転移関連接着分子CD44の新規機能的エピトープと新規リガンドの同定

CD44（一种与癌症转移相关的粘附分子）的新功能表位和新配体的鉴定

基本信息

批准号：
12770107
负责人：
村井稔幸
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

癌細胞の転移過程における接着分子CD44の役割の解明を目的として、CD44の新規エピトープおよび新規リガンドの同定とそれらの機能解析を行い、次の成果を得た。1.CD44の新規エピトープの癌転移における生理的機能平成12年度において、抗CD44モノクローナル抗体(mAb)IM7刺激によりCD44の癌細胞表面からの解離(shedding)が起こることを見出した。平成13年度においては、その誘導機構および癌転移への関与の解析を行った。その結果、IM7 mAbによるshedding誘導時には、細胞骨格にmembrane ruffling形成の誘導が認められ、そのruffling部位へのCD44の局在化が観察された。さらに、Boyden chamberを用いたin vitroでの細胞浸潤検定において、IM7 mAb刺激により癌細胞の浸潤能が上昇することを明らかにした。これらの知見は、CD44の新規エピトープを介して細胞内に導入されたシグナルが、癌の浸潤・転移に関わることを示唆するものである。この成果を論文として報告するとともに、今後さらに、in vivoにおける癌転移への関与を明らかにする予定である。2.CD44の新規リガンドの癌転移における役割平成12年度において、CD44を発現している癌細胞がコンドロイチン硫酸上で口ーリングを起こすことを見出した。平成13年度においては、このCD44のリガンドとして機能するコンドロイチン硫酸を免疫原としてmAbを作製した。現在、これを用いてコンドロイチン硫酸のCD44との結合に関与する構造とそのin vivoでの存在部位の同定を行っている。

为了阐明粘附分子CD44在癌细胞转移过程中的作用，我们鉴定了CD44的新表位和新配体并分析了它们的功能，得到了以下结果。 1. 新型CD44表位在癌症转移中的生理功能2000年，我们发现用抗CD44单克隆抗体（mAb）刺激IM7会导致CD44从癌细胞表面脱落。 2001年，我们分析了其诱导机制及其与癌症转移的关系。结果，当IM7 mAb诱导脱落时，在细胞骨架中观察到膜皱褶形成，并且观察到CD44定位于皱褶位点。此外，使用 Boyden 小室进行的体外细胞侵袭测定表明，IM7 mAb 刺激增加了癌细胞的侵袭能力。这些发现表明，通过 CD44 新表位引入细胞的信号参与癌症侵袭和转移。除了在论文中报告这一结果外，我们还计划进一步阐明其在体内癌症转移中的作用。 2. CD44新配体在癌症转移中的作用2000年，我们发现表达CD44的癌细胞在硫酸软骨素上引起唇鸣。 2001 年，我们使用硫酸软骨素（其作为 CD44 的配体）作为免疫原创建了 mAb。我们目前正在使用它来鉴定硫酸软骨素与 CD44 结合所涉及的结构及其体内位点。