レプチン、レムナントリポ蛋白の血管系細胞に与える作用

瘦素和残余脂蛋白对血管细胞的影响

• 批准号: 11770644
• 负责人: 中田 正範
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jichi Medical University (2000)Kagoshima University (1999)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770644/
• 关键词: レプチン; レムナントリパ蛋白; 血小板; 血管内皮細胞; レムナントリポ蛋白

脂肪細胞が産する各種サイトカインの一つであるレプチンは、主に中枢神経系に作用して摂食抑制作用を発揮する。レプチン受容体は造血組織にも存在し作用することが知られてきている。本研究の目的の一つはレプチンの血小板凝集作用、血管内皮細胞障害作用、平滑筋増殖作用の有無を検討し、その細胞内情報伝達機構の解明である。レプチン受容体が血小板、血管内皮細胞、平滑筋細胞に発現していることは確認した。ADPにより惹起される血小板凝集反応のレプチンによる促進効果を見出した。これはレプチン刺激により血小板内蛋白のチロシンリン酸化の増強によるものであることを見出した。細胞内情報伝達にJAK2が関与していることを確認した。本研究の目的の二つ目は糖尿病患者で、近年注目されている脂質因子であるレムナントリポ蛋白と肥満関連遺伝子であるβ3-アドレナリン受容体変異の相関、及び血清より抽出したレムナントリポ蛋白の血管内皮細胞や単球マクロファージに対する凝固因子や接着因子の発現に及ぼす影響を検討することである。全血よりDNAを抽出し、PCR法にてβ3-アドレナリン受容体遺伝子を部分増幅し、そのPCR産物をダイレクトシークエンスをし、Trp64Arg変異を検討した。Trp64Arg変異を有する患者は血清レムナントリポ蛋白濃度が上昇している事が解った。レムナントリポ蛋白を糖尿病患者より抽出し、臍帯由来の血管内皮細胞と単球細胞株THP-1を用い接着因子(P-selectin、E-selectin)、凝固系蛋白(thrombomodulin、thrombin receptor)発現増強効果をFACSにより検討を行った。血管内皮細胞ではE-selectinが、THP-1細胞ではthrombin receptorの発現増強が認められた。

瘦素是脂肪细胞产生的各种细胞因子之一，主要作用于中枢神经系统，并发挥食物抑制作用。瘦素受体也存在于造血组织中。这项研究的目的之一是研究瘦素是否具有血小板聚集，血管内皮细胞损伤和平滑肌增殖作用，并阐明其细胞内信号传导机制。已经证实，瘦素受体在血小板，内皮细胞和平滑肌细胞上表达。我们发现瘦素在ADP诱导的血小板凝集反应中的启动子效应。发现这是由于瘦素刺激增强了脂肪蛋白内蛋白质的酪氨酸磷酸化。已确认JAK2参与细胞内信号传导。这项研究的第二个目的是研究脂质因子残留蛋白的相关性，近年来一直吸引糖尿病患者的注意力，以及与肥胖相关基因β3-肾上腺素能受体的突变，以及血清exexand exexand exexand exexand splact蛋白对凝结因子和粘附因子的表达的作用。从全血中提取DNA，通过PCR部分扩增β3-肾上腺素受体基因，然后直接对PCR产物进行测序以检查TRP64ARG突变。发现患有TRP64ARG突变的患者血清薪酬蛋白浓度增加。从糖尿病患者中提取残余脂蛋白，并使用源自脐带的血管内皮细胞和单核细胞系THP-1来研究增强粘附因子表达（P-塞链蛋白，E-粘蛋白）和凝结蛋白（使用FALOMBOMBOMODULIL，血栓蛋白，血栓蛋白）的表达的影响。在血管内皮细胞中观察到E-选择素，并且在THP-1细胞中增强了凝血酶受体。

项目成果

Sarker KP,Abeyama K,Nishi J,Nakata M,Tokioka T,Nakajima T,Kitajima I,Maruyama I: "Inhibition of thrombin-induced neuronal cell death by recombinant thrombomodulin and E5510,a synthetic thrombin receptor signaling inhibitor"Thromb Haemost. 82. 1071-1077 (1

Sarker KP、Abeyama K、Nishi J、Nakata M、Tokioka T、Nakajima T、Kitajima I、Maruyama I：“重组血栓调节蛋白和 E5510（一种合成的凝血酶受体信号抑制剂）抑制凝血酶诱导的神经细胞死亡”Thromb Haemost。

Yamada K,Nakata M et al: "Measurement of glucose uptake and intracellular calcium concentration in single, living pancreatic β-cells."Journal of Biological Chemistry. 275. 22278-22283 (2000)

Yamada K、Nakata M 等人：“单个活胰腺 β 细胞中葡萄糖摄取和细胞内钙浓度的测量。”生物化学杂志 275. 22278-22283 (2000)

Nakata M,Yada T,Soejima N,Maruyama I: "Leptin Promotes Aggregation of Human Platelets via the Long Form of its Receptor."Diabetes. 48. 426-429 (1999)

Nakata M，Yada T，Soejima N，Maruyama I：“瘦素通过其受体的长形式促进人类血小板的聚集。”糖尿病。

Nakata M,Uto N,Maruyama I,Yada T: "Nitric oxide induces apoptosis via Ca2+-dependent processes in the pancreatic β-cell line MIN6"CELL STRUCTURE AND FUNCTION. 24. 451-455 (1999)

Nakata M、Uto N、Maruyama I、Yada T：“一氧化氮通过胰腺 β 细胞系 MIN6 中的 Ca2+ 依赖性过程诱导细胞凋亡”《细胞结构和功能》。

Maruyama I,Nakata M et al: "Effect of leptin in platelet and endothelial cells. Obesity and arterial thrombosis."Ann N Y Acad Sci.. 902. 315-319 (2000)

Maruyama I、Nakata M 等人：“瘦素对血小板和内皮细胞的影响。肥胖和动脉血栓形成。”Ann N Y Acad Sci.. 902. 315-319 (2000)