特異的定量法に基づく葉酸欠乏症の発症機序の解明

基于特定定量方法阐明叶酸缺乏症的发病机制

基本信息

批准号：
10780081
负责人：
中田理恵子
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nara Women's University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者は、葉酸欠乏症の発症機序、さらには生体での葉酸の機能を、化学的に正確な量を基礎として解明するための研究を推進している。本年度は、葉酸代謝とビタミンB_<12>との関係を検討した。ビタミンB_<12>は葉酸と同様に、DNA合成や細胞増殖にとって必須のビタミンであり、その欠乏によって葉酸代謝に何らかの変化をひき起こすと考えられているが、物質レベルで相互作用の検討は十分になされていない。そこで、生体内での葉酸とビタミンB_<12>の関係を明らかにするため、葉酸欠乏(F群)、ビタミンB_<12>欠乏(B群)、葉酸とビタミンB_<12>欠乏(BF群)ラットを各々6週間飼育して、その欠乏過程における葉酸誘導体量、ビタミンB_<12>量、葉酸代謝に関連する物質を定量した。肝臓中の葉酸誘導体は、還元条件下で肝臓より抽出した後、HPLCにて分離し、電気化学的に検出する方法により特異的に定量した。F群とBF群では、葉酸誘導体量が2週目より有意に減少した。また、B群においても、葉酸を十分摂取しているにもかかわらず、4週目から葉酸誘導体量の有意な減少がみられた。一方、肝臓中のビタミンB_<12>量は、B群、BF群において4週目より大きく減少したが、F群では減少はみられなかった。以上のように、ビタミンB_<12>の欠乏は葉酸誘導体量の減少をひき起こすが、葉酸の欠乏はビタミンB_<12>量に変化を与えないことが明らかになった。さらに、葉酸を基質とし、ビタミンB_<12>を補酵素として生体内で働くメチオニンシンターゼ活性を測定した結果、補酵素であるビタミンB_<12>の欠乏によって、B群とBF群において2週目より有意に減少した。また、肝臓中のヌクレオチド量は、F群、BF群において有意な変化がみられたが、B群では変化がみられなかった。F群、BF群においては、ヌクレオチド量のインバランスを反映して、肝臓中のDNA、RNA量の減少がみられた。

申请人正在推动研究，以基于化学精确量来阐明叶酸缺乏的发病机制以及叶酸在活体内的功能。今年，我们研究了叶酸代谢与维生素B_<12>之间的关系。维生素B_<12>与叶酸一样，是DNA合成和细胞生长所必需的维生素，其缺乏被认为会引起叶酸代谢的一些变化，但物质水平上的相互作用尚未得到充分研究。完毕。因此，为了明确体内叶酸与维生素B_<12>的关系，我们对叶酸缺乏症（F组）、维生素B_<12>缺乏症（B组）以及叶酸与维生素B_<12>缺乏症进行了研究(BF组))将大鼠每只饲养6周，对缺乏过程中叶酸衍生物、维生素B_12以及与叶酸代谢相关的物质的量进行定量。在还原条件下从肝脏中提取肝脏中的叶酸衍生物，通过HPLC分离，并通过电化学检测具体定量。 F组和BF组叶酸衍生物量从第二周开始明显下降。此外，在B组中，尽管摄入了足够的叶酸，但从第4周开始，叶酸衍生物的量显着减少。另一方面，B组和BF组从第4周开始肝脏中维生素B_12的量显着减少，但F组没有观察到减少。如上所述，已经清楚的是，尽管维生素B_ 12 缺乏导致叶酸衍生物的量减少，但叶酸缺乏并不改变维生素B_ 12 的量。另外，测定以叶酸为底物、以维生素B_<12>为辅酶在体内发挥作用的蛋氨酸合酶的活性，结果发现，作为辅酶的维生素B_<12>的缺乏，导致其下降更为显着。此外，F组和BF组肝脏中的核苷酸量发生了显着变化，但B组中没有观察到变化。在F组和BF组中，观察到肝脏中DNA和RNA的量减少，反映了核苷酸量的不平衡。