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肝切除後の肝再生補助に関する遺伝子治療の新案-Cre/loxP systemを用いた導入遺伝子発現のコントロールは可能か?
支持肝切除后肝再生的新基因治疗方案 - 是否可以使用 Cre/loxP 系统控制转基因表达？
基本信息
- 批准号：10770635
- 负责人：
- 金额：$ 1.22万
- 依托单位：
- 依托单位国家：日本
- 项目类别：Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份：1998
- 资助国家：日本
- 起止时间：1998 至 1999
- 项目状态：已结题
- 来源：
- 关键词：
项目摘要
実験-1:マウスHGF遺伝子の単離、精製三菱よりマウスHGF cDNAを含むplasmidを購入し、DNAを抽出、精製する。HGF cDNAを適切な制限酵素で切り出し精製する。もしくはHGF exon 1から15に特異的なPCRプライマーを作成し、HGF cDNA全長を増幅し、精製する。loxP配列を含むファージDNAをCLONTECHより購入し、loxP配列のみを切り出し一度結合させる。上記で作成したHGF cDNA全長を2つのloxP配列の間に挿入しloxP-HGF cDNA-loxPを得る。この流にはCMVプロモーターを下流にはneo遺伝子(ネオマイシン耐性遺伝子)を組み込む。現在、再考を加えつつ、この導入遺伝子を作製中である。
实验1：从三菱菌中含有小鼠HGF cDNA的小鼠HGF基因的分离和纯化，提取和纯化DNA。用适当的限制酶切除HGF cDNA并纯化。另外，创建了针对HGF外显子1至15的PCR引物，以放大和纯化HGF cDNA的全长。含有LOXP序列的噬菌体DNA是从Clontech购买的，仅切除LOXP序列并结扎一次。在两个LOXP序列之间插入上面创建的HGF cDNA的全长，以获得LOXP-HGF cDNA-LOXP。该流融合了NEO基因（新霉素耐药基因）下游的CMV启动子。我们目前正在使用重新考虑来创建此转基因。
项目成果
期刊论文数量（0）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
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