繊維状・粒子状物質の発癌性に関するin vitroにおける評価方法の開発

纤维状和颗粒物致癌性体外评价方法的开发

• 批准号: 09770245
• 负责人: 紙谷 尚子
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770245/
• 关键词: 石綿; 人造鉱物繊維; J774細胞; ディーゼル粒子; 発癌性; 8-ヒドロキシグアノシン

本研究は、繊維状粉塵及び微粒子状物質の発癌性を迅速かつ簡便な方法を用いて評価することを目的とするものである。本実験で用いたマウスJ774細胞は、マクロファージ様の貧食能を有する細胞である。被験物質をJ774細胞に曝露し、発癌性を評価する指標として細胞内DNA中の8-hydroxy-2'-deoxyguanosine(8-OH-dG)量を測定した。被験物質として天然鉱物繊維であるクロシドライトを用いて曝露条件について検討した結果、曝露濃度が100μg/ml、曝露時間が18時間の条件が最適であることが明らかになった。前年度の研究に続き、本条件により数種類の鉱物繊維の曝露実験を行なったところ、クロシドライト及びアモサイトでは8-OH-dGの有意な上昇がみられた。一方、セラミックファイバー、グラスファイバー、チタン酸カリウムウィスカでは8-OH-dG上昇は認められなかった。この結果は、本実験方法が発癌性の評価システムとして有用であることを示している。さらに、被験物質としてディーゼル微粒子について検討した。ディーゼル微粒子の曝露により8-OH-dG量は上昇の傾向がみられたが、データのばらつきが極めて大きく、現段階では再現性に欠いている。顕微鏡での観察から、ディーゼル微粒子は細胞培養液中で相互に接着して「大きい粒子」を形成していることが判明した。このためJ774細胞による粒子の貧食に差が生じたものと考えられる。現在、細胞に曝露するディーゼル微粒子の前処理について検討中である。

这项研究旨在使用快速便捷的方法评估纤维灰尘和颗粒物的致癌性。该实验中使用的小鼠J774细胞是具有巨噬细胞样敏感性的细胞。该测试物质暴露于J774细胞，并测量了细胞内DNA中8-羟基-2'-脱氧鸟苷（8-OH-DG）的量作为评估癌变的指标。使用Crocidolite（一种天然矿物纤维）作为测试物质检查暴露条件，表明最佳条件是暴露浓度为100μg/ml的疾病，暴露时间为18小时。在上一年的研究之后，进行了实验，以在这些条件下暴露几种类型的矿物纤维，并且在氯乙酸盐和弹药板中观察到了8-OH-DG的显着增加。另一方面，在陶瓷纤维，玻璃纤维和钛酸钾晶须中未观察到8-OH-DG的增加。结果表明，这种实验方法可作为评估癌症致癌性的系统。此外，检查了柴油细颗粒作为测试物质。柴油机颗粒的暴露显示出增加8-OH-DG量的趋势，但是数据变化极大，在此阶段，它缺乏可重复性。显微镜观察表明，在细胞培养基中相互粘附的柴油颗粒形成“大颗粒”。人们认为这导致了由J774细胞引起的颗粒不良饮食的差异。当前，正在考虑暴露于细胞的柴油颗粒的预处理。

项目成果

Naoko Murata-Kamiya: "Determination of carcinogenic potential of mineral fibers by 8-hydroxydeoxyguanosine as a marker of oxidative DNA damage in mammalian cells" Int.Arch.Occup.Environ.Health. 70. 321-326 (1997)

Naoko Murata-Kamiya：“通过 8-羟基脱氧鸟苷作为哺乳动物细胞氧化 DNA 损伤的标记来测定矿物纤维的致癌潜力”Int.Arch.Occup.Environ.Health。