牛のボツリヌスC型、D型中毒の両方に効果のあるリコンビナントワクチンの作製

生产有效对抗牛 C 型和 D 型肉毒杆菌中毒的重组疫苗

基本信息

批准号：
09770180
负责人：
藤永由佳子
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770180/
关键词：
Clostridium botulinum ボツリヌス毒素 neurotoxin ワクチン経鼻接種

项目摘要

安全で効果の高いボツリヌスC,D型リコンビナントワクチンを作製する目的で,C型HAl,HA2,およびHA3のGST(glutathione-S-transferase)融合タンパク質とアジュバントとして大腸菌のLTを加えて、マウスに経鼻接種したところ、ワクチン効果はあるが、C型progenitor toxinをアルカリ処理して調製した無毒成分のトキソイドを同様に接種した場合より、弱く不充分であった(前年度報告書)。リコンビナント混合ワクチンの場合、高次構造がnativeのHA部分と異なる可能性があるため、神経毒素(軽鎖および重鎖)を含まなC型progenitor toxinの変異体を、ボツリヌス(C)-N71株より精製し、そのワクチン効果を検討した。その結果、(C)-N71のProgenitortoxin変異体ワクチンもリコンビナントワクチンと同様に、効果はあるが弱く不充分であることが明らかとなった。各ワクチンを投与したマウスの腸液および血清を用いたウエスタンブロッティングを行ったところ、C型progenitor toxinより調製した無毒成分のトキソイドを投与したマウスの血清および腸液中には、無毒成分に加えて、ワクチン中に混入していた神経毒素の軽鎖および重鎖に対する抗体が存在していた。リコンビナントワクチンと(C)-N71のprogenitor toxin変異体を投与したマウスでは、それぞれHa、HAとNTNHに対する抗体は存在していたが、神経毒素に対する抗体は検出されなかった。従って高いワクチン効果を得るためには神経毒素成分も重要であると考えられる。

为了产生安全有效的肉毒纤维C-D重组疫苗，通过在C-Type HAL，HA2，HA2和HA3和HA3和LT的大肠杆菌作为佐剂作为佐剂的C-Type HAL，HA2和LT的GST中接种小鼠。尽管它具有疫苗作用，但与通过碱处理的C型祖细胞毒素制备的非毒性毒素相似（上一年的报告），它弱和不足。在重组混合疫苗的情况下，高阶结构可能与天然的HA部分不同，因此从肉毒杆菌（C）-N71菌株和疫苗效应研究了含有神经毒素（轻和重链）的C型祖细胞毒素的突变体。结果，可以发现（C）-N71多毒素突变体疫苗（类似于重组疫苗）是有效但弱且不足的。使用接收每种疫苗的小鼠的肠流体和血清进行蛋白质印迹，并从接收无毒毒素的小鼠的肠道液（一种由C型祖细胞毒素制备的非毒性成分，一种无毒成分），被发现具有针对神经毒素污染的光和重型链的抗体，并与污染不合同的链蛋白相抗体。在接受重组疫苗的小鼠和（C）-N71的祖细胞毒素突变体的小鼠中，分别存在HA，HA和NTNH的抗体，但未检测到与神经毒素的抗体。因此，神经毒素成分也被认为对于获得高疫苗作用很重要。