牛のボツリヌスC型、D型中毒の両方に効果のあるリコンビナントワクチンの作製

生产有效对抗牛 C 型和 D 型肉毒杆菌中毒的重组疫苗

基本信息

批准号：
09770180
负责人：
藤永由佳子
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770180/
关键词：
Clostridium botulinum ボツリヌス毒素 neurotoxin ワクチン経鼻接種

项目摘要

安全で効果の高いボツリヌスC,D型リコンビナントワクチンを作製する目的で,C型HAl,HA2,およびHA3のGST(glutathione-S-transferase)融合タンパク質とアジュバントとして大腸菌のLTを加えて、マウスに経鼻接種したところ、ワクチン効果はあるが、C型progenitor toxinをアルカリ処理して調製した無毒成分のトキソイドを同様に接種した場合より、弱く不充分であった(前年度報告書)。リコンビナント混合ワクチンの場合、高次構造がnativeのHA部分と異なる可能性があるため、神経毒素(軽鎖および重鎖)を含まなC型progenitor toxinの変異体を、ボツリヌス(C)-N71株より精製し、そのワクチン効果を検討した。その結果、(C)-N71のProgenitortoxin変異体ワクチンもリコンビナントワクチンと同様に、効果はあるが弱く不充分であることが明らかとなった。各ワクチンを投与したマウスの腸液および血清を用いたウエスタンブロッティングを行ったところ、C型progenitor toxinより調製した無毒成分のトキソイドを投与したマウスの血清および腸液中には、無毒成分に加えて、ワクチン中に混入していた神経毒素の軽鎖および重鎖に対する抗体が存在していた。リコンビナントワクチンと(C)-N71のprogenitor toxin変異体を投与したマウスでは、それぞれHa、HAとNTNHに対する抗体は存在していたが、神経毒素に対する抗体は検出されなかった。従って高いワクチン効果を得るためには神経毒素成分も重要であると考えられる。

为了产生安全有效的肉毒杆菌C，D型重新疫苗，加入C型HAL，HA2和HA3 GST（Glutathione-S-转移酶）融合蛋白和伴侣作为欣喜若狂，尽管如此鼻腔疫苗接种是一种疫苗作用，但与碱性加工C -Type祖细胞毒素制备的毒素相比，它比毒素弱和不足（上一年）。在重新征用的混合疫苗的情况下，高阶结构可能与天然的HA部分不同，因此C型祖细胞祖细胞毒素突变体含有神经磷酸化（轻链和重链）是肉毒杆菌（C）-N71被更纯化并检查了疫苗效应。结果，很明显，（C）-N71的后代毒素变异疫苗与重组疫苗一样有效，但不足和不足。当使用肠液和血清进行施用每种疫苗的小鼠的蛋白质印迹时，用祖细胞毒素制成的小鼠的血清和肠道液体是由祖细胞毒素制备的，这些毒素是由祖细胞毒素制备的。内部混合的重链神经毒素。在给施用重新疫苗和A（c）-N71祖细胞毒素突变体的小鼠中，有针对HA，HA和NTNH的抗体，但未检测到神经毒素的抗体。因此，神经毒素成分被认为对于获得高疫苗作用很重要。