アンチセンス法を用いた脊髄痛覚伝達・増強機構に関与するG蛋白質の解析

反义方法分析参与脊髓疼痛传递/增强机制的G蛋白

基本信息

  • 批准号:
    09770057
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1997 至 1998
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本年度も引き読き成熟ラット及び新生ラットにおける様々な即時痛・慢性痛モデルに対する各種G蛋白質αサブユニット(Gα)アンチセンス及びセンスオリゴデオキシヌクレオチド(アンチセンス:AS;センス:S)の効果を検討した。成熟ラットにおいては様々な即時痛刺激(機械、熱、化学的刺激)に対し、Gα(Gα_q、Gα_<ll>、Gα_o、Gα_<i-1>、Gα_<i-2>、Gα_<i-3>)AS並びにSはほとんど効果がなかった。炎症性疼痛モデルとしてはホルマリンテストの第2相反応を指標に用い、Gα_q及びGα_<ll>ASの効果を検討したところ、Gα_qASは第2相反応を有意に抑制したが、Gα_<ll>ASはほとんど効果を示さなかった。両者のSは共に効果を示さなかった。神怪因性疼痛モデルとしては坐骨神経絞扼神経損傷モデルを用いた。神経損傷により誘発される熱性痛覚過敏及び機械的異痛現象発現の時間経過はGα_oASにより有意に延長されるが、Sは効果を示さないことが示唆された。一方Tail flick法を用いて観察されるモルヒネの鎮痛効果に対するGα_i及びGα_oASの効果を検討したところ、Gα_<i-l>ASは有意にモルヒネの鎮痛効果を抑制したが、Gα_oASはほとんど効果を示さず、マウスにおける報告とは異なる結果を得た。上記のASの効果は蛋白質発現減少を伴っていることをウニスタンブロット法にて確認した。以上の結果に関して現在論文作成中である。新生ラットにおいては強度電気刺激により誘発される脊髄多シナプス伝達を抑制する神経伝達物質(GABA、オピオイド)に対するGα_iAS及びSの効果を検討した。ASあるいはSを髄腔内に投与して2日後脊髄を摘出し実験を行った。その結果Gα_<i-l>ASはオピオイド(エンケファリン、エンドモルフィン)の濃度依存性抑制効果を減弱させたが、GABA_B作用薬バクロフェンの効果に対しては影響しなかった。Gα_<i-2>及びGα_<i-3>については現在検討中である。
今年,我们研究了各种G蛋白α亚基(Gα)反义和寡头脱氧核苷酸(反义:AS; sense:s)对成熟和新生大鼠的各种直接和慢性疼痛模型的影响。在成熟的大鼠中,gα(gα_q,gα_<ll>,gα_O,gα_<i-1>,gα__<i-2>,gα__<i-3>)at as as as as as as as as as as and s对各种即时疼痛刺激(机械,热,化学刺激)的影响很小。作为炎症疼痛模型,我们使用福尔马林测试的2阶段响应作为指标,当我们检查gα_q和gα__<ll>的效果时,gα_qas显着抑制了第2阶段的响应,但是Gα__<ll>几乎没有效果。两个SS都没有作用。坐骨神经扼杀神经损伤模型被用作神圣的怪兽疼痛模型。神经损伤诱导的热痛觉过敏和机械性异常性症的发作的时间过程显着延长了Gα_OAS,但建议S不会显示出效果。另一方面,当我们研究Gα_i和Gα_OAS对使用尾部弹片方法观察到的吗啡的镇痛作用的影响时,Gα_<i-l>显着抑制了吗啡的镇痛作用,但是Gα_OAS的镇痛作用很小,但几乎没有效果,从而产生的作用很小,从而导致了与小鼠的不同结果。通过Unistan印迹证实,上述AS的作用伴随着蛋白质表达的降低。上述结果目前正在建设中。我们研究了Gα_IAS和S对神经递质(GABA,阿片类药物)的影响,这些神经递质抑制了新生大鼠强烈的电刺激引起的脊柱多突触传递。两天后,去除脊髓并去除脊髓并进行实验。结果,Gα_<i-l>由于减弱了阿片类药物的浓度依赖性抑制作用(Enkephalin,内派),但不影响GABA_B agonist baclofen的作用。 Gα_<i-2>和Gα_<i-3>目前正在考虑。

项目成果

期刊论文数量(20)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
栗原 崇、田邊 勉: "電位依存性カルシウムチャネルの分子的多様性 : 構造-機能相関と組織特異的発現" 循環器科. 44. 1-12 (1998)
Takashi Kurihara、Tsutomu Tanabe:“电压门控钙通道的分子多样性:结构-功能关系和组织特异性表达”心脏病学系 44. 1-12 (1998)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
栗原 崇、田邊 勉: "電位依存性カルシウムチャネル" 蛋白質核酸酵素. (印刷中). (1998)
Takashi Kurihara,Tsutomu Tanabe:“电压门控钙通道”蛋白质核酸酶(1998 年)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Uchida.D.et al.: "Effect of maxadilan(a specific agonist of PACAP receptor type 1)and its antagonist M65 on specific binding sites for PACAP in rat spinal cord." Folia Endocrinologica Japonica. 74 No.2. 246 (1998)
Uchida.D.等人:“maxadilan(1 型 PACAP 受体的特异性激动剂)及其拮抗剂 M65 对大鼠脊髓中 PACAP 特异性结合位点的影响”。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
村越 隆之、栗原 崇、三枝 弘尚、田邊 勉: "イオンチャネルの分子生物学" 羊土社, 139 (1998)
Takayuki Murakoshi、Takashi Kurihara、Hironaka Saegusa、Tsutomu Tanabe:“离子通道的分子生物学”Yodosha,139(1998)
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  • 发表时间:
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  • 通讯作者:
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