アポリポタンパク質A-IV遺伝子発現を制御するラット小腸由来体液性因子の探索

寻找控制载脂蛋白 A-IV 基因表达的大鼠小肠源性体液因子

基本信息

批准号：
09760121
负责人：
園山慶
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

小腸上皮細胞に発現するアポリポタンパク(アポ)A-IVは、脂質代謝ならびに食欲・消化管機能調節に関与するので、このものの発現調節機構を明らかにすることは脂質代謝、摂食行動、消化管機能の調節機構を解明することにもつながる。本研究では、小腸上皮細胞におけるアポA-IV遺伝子発現に関与する小腸由来体液性因子について主として細胞培養系を用いて解析した。とりわけ筆者のこれまでのラットを用いた解析により消化管ホルモンであるペプチドYY(PYY)がアポA-IV発現に関与することが予想されたので、このものがアポA-IV遺伝子発現に及ぼす影響を解析した。小腸上皮細胞様に分化する事が知られているヒト結腸ガン由来細胞株Caco-2をモデルとして用い、PYYがアポA-IVmRNAレベルに及ぼす影響について、半定量的なRT-PCR及びサザン解析により検討した。その結果、分化したCaco-2細胞において、PYYは用量ならびに時間依存性にアポA-IVmRNAレベルを増加させた。一方、小腸上皮細胞において発現することが知られている、アポA-I、B、及びC-III mRNAには変化が見られなかった。更に、PYYは細胞膜表面の特異的な受容体を介してその生理機能を発揮するが、本研究においてCaco-2細胞におけるPYY受容体のmRNA発現について解析したところ、Y1受容体のmRNAはPYY添加後、一過性の増加を示した。一方、Y2及びY5受容体のmRNAは、RT-PCRにより検出されなかった。以上の結果は、腸上皮細胞株Caco-2においてPYYがアポ-IV遺伝子発現を特異的に刺激することを示唆し、その刺激はおそらくY1受容体を介して伝達されるものと推測された。

在小肠上皮细胞中表达的Apolipotampaku（预约）A-IV参与脂质代谢和食欲 /消化管辖权，因此阐明该产品的表达是脂质代谢，进食行为，也导致了消化道。功能的调整机制。在这项研究中，主要使用细胞培养分析了小肠A-IV基因表达参与APO A-IV基因表达的小液体液体因子。特别是，预计肽YY（PYY）（PYY）（PYY）（一种胃肠道激素）将由于使用大鼠到目前为止的分析而参与APO A-IV表达，因此这是对Apo A-IV基因表达的影响分析。人类结肠癌衍生的细胞储备CACO-2被称为小肠上皮细胞，用作模型，并通过语义RT-PCR和Southern分析对PYY对APO A-IVMRNA的影响我考虑了。结果，在分化的Caco-2细胞中，PYY将Apo A-IVMRNA水平提高到剂量和时间依赖性。另一方面，已知在小肠上皮细胞中表达的Apo A-I，B和C-III mRNA没有变化。此外，PYY通过特定的受体在细胞膜表面上发挥其生理功能，但是在这项研究中，Caco-2细胞中Y1受体的mRNA被分析，Y1受体的mRNA添加了PYY瞬态增加。另一方面，RT-PCR未检测到Y2和Y5受体的mRNA。上述结果表明，PYY在肠内内皮细胞库存CACO -2中特异性刺激了APO -IV基因的表达，并被认为刺激可能会通过Y1受体传播。