歯髄組織破壊における多形核白血球浸潤の細胞傷害性に関する研究

多形核白细胞浸润对牙髓组织破坏的细胞毒性研究

基本信息

批准号：
08771701
负责人：
中西正
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

不可逆性歯髄炎では、多形核白血球(PMN)が多量に集積することにより歯髄組織が破壊されているのではないかと考え、in virtoでPMNを歯髄細胞に直接作用させたところ、PMN数および作用時間依存的に傷害歯髄細胞数が増大し、培養上清中のエラスターゼ濃度や細胞外基質のフィプロネクチン濃度が上昇することをこれまでに明らかにしてきた。今回、PMNの歯髄細胞傷害の機序をさらに明らかにするため、まず傷害因子と考えられているプロテアーゼおよび活性酵素について、それらのインヒビター(プロテアーゼインヒビター、スーパーオキサイドディスムターゼ)を加えたときの傷害抑制効果をクリスタルバイオレット染色法により検討したところ、プロテアーゼインヒビターでは傷害抑制がみられたが、スーパーオキサイドディスムターゼでは傷害抑制は認められなかった。さらに、PMNの歯髄細胞への接着の有無が細胞傷害に影響しているか否かについて検討したところ、非接着条件下の方が直接作用させた場合に比べ、傷害度は低かった。また、歯髄細胞傷害時におけるフィブロネクチンの変化をウエスタンブロット法にて検討したところ、非傷害細胞の接着上清中のフィブロネクチンは分子量約220KDの一本のバンドとして認められたのに対し、傷害細胞では訳100〜200kDの数本のバンドに分解されていた。以上の結果より、プロテアーゼなど過剰のPMN由来傷害因子の作用により細胞外基質が破壊され、歯髄細胞が剥離し傷害される可能性が示唆された。

在不可逆的肺炎中，人们认为，浆液组织可能会因大量多形性核白细胞（PMN）的积累而破坏，当PMN直接应用于仙女中的PMN时，受伤的浆细胞的数量是受伤的浆细胞的数量，其依赖的方式和浓度的集中量增加了，其浓度是众所周知的，其浓度是培养的，并且是培养的培养物，并且培养了培养的量。细胞外基质中的菲普朗蛋白。为了进一步阐明PMN中牙髓细胞损伤的机制，我们首先检查了通过使用晶体紫罗兰色染色，抑制蛋白酶和活性酶（被认为是损伤因素）的抑制作用，并添加了抑制剂时抑制损伤的影响（蛋白酶抑制剂，超氧剂量疗法酶）。为了进一步阐明PMN中果肉损伤的机制，首先通过晶体紫罗兰色染色检查了损伤的机理。在蛋白酶抑制剂的情况下，未观察到超氧化物歧化酶对损伤的抑制作用。此外，当我们研究PMN对浆细胞的存在或不存在会影响细胞损伤时，损伤程度低于在非粘附条件下直接影响PMN的程度。此外，当通过蛋白质印迹检查肺细胞损伤期间纤连蛋白的变化时，发现无损伤细胞的粘合剂上清液中的纤连蛋白被发现是一个约220 kD的单个带，而在受伤的细胞中，它将其降解为几个100-200 kD的频段。以上结果表明，细胞外基质可能会因过量PMN衍生的损伤因子（例如蛋白酶）的作用而破坏，从而导致牙髓细胞分离并导致损伤。