ヒトsmall maf遺伝子のクローニング

人类小maf基因的克隆

• 批准号: 08770544
• 负责人: 土岐 力
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770544/
• 关键词: small maf; mafK; mafG

【本研究の背景】組織特異的転写因子NF-E2は、巨核球と赤芽球の分化・成熟に、重要な働きをしている。その小サブユニットであるsmall maf原癌遺伝子ファミリーは、ロイシンジッパー・DNA結合タンパクをコードしているが、ヒトのホモログについては遺伝子構造が明らかになっていない。【本研究の目的】ヒトのsmall maf転写因子をコードする遺伝子の単離と構造決定および、遺伝子座を決定すること。【研究によって得られた知見・成果】[1.ヒトsmall maf転写因子群の遺伝子の単離]まず、ヒトmafKおよびmafGのcDNAを単離した。これをもとに、PCR用プライマーをデザインし、P1ファージ・ヒト遺伝子ライブラリーをPCR法でスクリーニングし、mafKおよびmafGの遺伝子を単離することができた。mafK、mafGともにORFは第二・三エクソンに存在し、非翻訳領域のみからなる第一エクソンは第二エクソンより、mafKで約8kb,mafGで約4.5kb上流に存在することを明らかにした。[2.ヒトsmall maf転写因子群の遺伝子座の決定]得られた遺伝子をプローブとして、FISH法にて、mafKは第7番染色体短腕に、mafGは17番染色体長腕に存在することを明らかにした。[3.各small maf転写因子のプロモーターの解析]赤芽球系および巨核球系の分化に伴って、mafKのプロモーターの活性化が認められた。プロモーターの構造との関係は、現在検索中である。

【研究背景】组织特异性转录因子NF-E2在巨核细胞和红细胞的分化成熟中发挥重要作用。它的小亚基，即小 maf 原癌基因家族，编码亮氨酸拉链 DNA 结合蛋白，但其人类同源物的遗传结构尚不清楚。 【本研究目的】分离并确定编码人小maf转录因子的基因结构，并确定基因位点。 [研究结果和结果] [1.人小maf转录因子组基因的分离] 首先，分离了人mafK和mafG的cDNA。在此基础上，我们设计了PCR引物，通过PCR筛选P1噬菌体人类基因库，并能够分离出mafK和mafG基因。我们发现mafK和mafG的ORF都存在于第二和第三外显子中，并且仅由非翻译区域组成的第一个外显子位于mafK中第二个外显子上游约8kb处，在mafG中位于第二个外显子上游约4.5kb处。 [2.人小maf转录因子群基因位点的确定]以获得的基因为探针，采用FISH方法确认mafK存在于7号染色体的短臂上，mafG存在于17号染色​​体的长臂上。揭示了。 [3.各小maf转录因子的启动子分析] 随着成红细胞和巨核细胞的分化，观察到mafK启动子的激活。与启动子结构的关系目前正在调查中。