上気道粘膜免疫におけるNKT細胞の機能解析と経鼻ワクチンへの応用

NKT细胞在上呼吸道粘膜免疫中的功能分析及其在鼻疫苗中的应用

基本信息

批准号：
25931052
负责人：
梅本真吾
金额：
$ 0.32万
依托单位：
Oita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25931052/
关键词：
ガラクトシルセラミド NKT細胞経鼻免疫

项目摘要

NKT細胞のリガンドであるα-ガラクトシルセラミド(α-G)をアジュバントとしてマウスに対し、3回経鼻投与を行い、NKT細胞を活性化し、上気道免疫応答を誘導してそのメカニズムについて検討した。・α-G経鼻投与したマウスから鼻粘膜(NP)およびnasal associated lymphoid tissue (NALT)より単核球を分離し、フローサイトメトリーにてNKT細胞と樹状細胞(DC)サブセットについて解析した結果、NALTにおいてα-G群でNKT細胞およびDCの増加を認めた。α-G群で成熟DCの頻度が高い傾向が示された。B細胞系の変化として、NPにおいてB2細胞優位となる傾向を認めた。・鼻粘膜CD4+ T細胞を分離精製し、IL-17、IL-22の発現について細胞サブセットの変化をフローサイトメトリーにて解析した結果、NPにおいてα-G群でIL-17産生細胞およびIL-22産生細胞の増加を認めた。NPにおけるTh17産生サイトカインmRNAの発現に関して、PCRではControl群と比して発現に有意差を認めなかった。・抗体産生細胞数をELISPOT法にて検討した結果、NPにおいてα-G群でIgA産生細胞の増加を認めた。・α-経鼻投与群は、control群に比してインフルエンザ菌、肺炎球菌のクリアランスが高かった。また肺炎球菌において、α-Gに加えてanti IL-17投与した群、anti IL-17とanti IL-22投与した群ではα-G単独投与群に比してクリアランスの低下を認めた。以上より、NKT細胞は直接的に免疫担当細胞と協調し、上気道粘膜においても生体防御に重要な役割を果たしていることが示唆され、α-Gの経鼻免疫アジュバントとしての有用性が示唆された。また上気道粘膜防御に関してTh17産生サイトカインであるIL-17, IL-22の関与が示唆された。

使用α-半乳糖基酰胺（α-G）在鼻内给予小鼠，NKT细胞的配体（作为佐剂）激活NKT细胞并诱导上呼吸道免疫反应，并研究了其机制。 - 从接受α-G鼻施用的小鼠中从鼻粘膜（NP）和鼻相关淋巴组织（NALT）中分离单核细胞，并通过流式细胞仪分析NKT细胞和树突状细胞（DC）次仪在NALT中的NKT细胞和DCS中显示出增加的NKT细胞和DCS的增加。显示趋势在α-G组中具有较高的成熟DC频率。作为B细胞系的变化，在NP中具有B2细胞优势的趋势。 - 分离并纯化鼻粘膜CD4+ T细胞，并通过流式细胞仪分析细胞子集的变化，以表达IL-17和IL-22的表达，NPS在α-G组中显示出IL-17产生的细胞和IL-22产生的IL-22产生细胞的增加。关于NP中产生Th17的细胞因子mRNA的表达，与对照组相比，PCR在表达上没有显着差异。 - 使用ELISPOT方法检查了产生抗体的细胞的数量，并在NPS中观察到α-G组中IgA产生细胞的增加。 - 与对照组相比，α-纳萨尔组的流感嗜血杆菌和肺炎球菌的清除率更高。此外，在接受抗IL-17的组中，在接受抗IL-17和抗IL-22的组中接受抗IL-17和抗IL-22的抗IL-17和抗IL-22，在接受抗IL-17和抗IL-22的组中，在接受α-G的抗IL-17和抗IL-22的组中，仅接受α-G的组单独接受α-G，清除率降低。从以上提出，NKT细胞直接与免疫反应性细胞合作，并在上呼吸道粘膜中在生物防御中起重要作用，这表明α-G作为鼻内免疫辅助剂的有用性。还提出，产生Th17的细胞因子IL-17和IL-22参与了上呼吸道粘膜防御。