大腸癌におけるWntおよびFrizzled-7の腫瘍検査学的意義の解明

阐明 Wnt 和 Frizzled-7 在结直肠癌中的肿瘤实验室意义

基本信息

批准号：
23933012
负责人：
西岡光昭
金额：
$ 0.45万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23933012/
关键词：
大腸癌 Wnt11 FZD7

项目摘要

研究目的:本研究では、FZD7のリガンド候補であるWnt3とWnt11の大腸癌細胞株や大腸癌組織における発現レベルを検討し、FZD7を介した大腸癌進展メカニズムの解明および、Wnt signaling pathwayにおける大腸癌マーカーとしての有用性について研究を行った。研究方法:以下の方法で研究を行った。1.大腸癌細胞株と大腸癌組織におけるWnt3及びWnt11 mRNA発現量の測定7つのヒト由来の大腸癌細胞株と、133名の大腸癌患者より得られた大腸癌組織からmRNAを抽出後、Wnt3及びWnt11のmRNA発現量を定量測定した。2.大腸癌におけるWnt蛋白の機能解析Wnt蛋白を安定して過剰発現する遺伝子導入細胞を作製し、その細胞を用いて細胞増殖能、細胞遊走能、細胞浸潤能の検討を行った。また、作製した細胞のcononical Wntシグナル経路及びnon-cononical Wntシグナル経路への影響を明らかにするために、各経路に特徴的な分子群の発現やリン酸化についてウェスタンブロット法にて検討した。研究成果:Wnt11過剰発現細胞を用いた実験では、Wnt11は細胞の増殖・運動・浸潤に関与していることが確認され、また、JNK、c-Junのリン酸化レベルが増加しておりnon-canonical Wntシグナル経路の活性化が示唆された。また、Wnt11 mRNAは非腫瘍組織に比べ腫瘍部組織で有意に発現量の高いことが確認された。一方、Wnt3 mRNA発現量に関しては有意な差は確認できなかった。手術後一定の期間においてdisease freeであった患者と、手術後に再発もしくは死亡された患者の腫瘍部組織でのWnt11 mRNA発現量を比較したところ、再発もしくは死亡された患者の腫瘍部組織においてWnt11発現量が有意に高いことが確認された。最後に、Wnt11とFZD7の両遺伝子とも高発現のグループは両遺伝子とも低発現のグループに比べ無病生存期間でが有意に短いことが確認できた。これらの結果より、Wnt11とFZD7の相互作用は大腸癌の進展に重要な役割を担っていることが示唆された。

研究目的：在这项研究中，我们检查了Wnt3和Wnt11的结直肠癌细胞库存和结直肠癌组织的表达水平，它们是FZD7的配体候选者，通过FZD7阐明了结直肠癌的机制，并且在Wnt中有结直肠癌信号途径。研究方法：研究是在以下方法中进行的。 1。在结直肠癌细胞和结直肠癌组织中的Wnt3和Wnt11 mRNA表达，提取从133名结直肠癌患者获得的7个衍生的结直肠癌细胞库存和mRNA，并测量WNT3和Wnt11的mRNA表达量。 2。对结直肠癌中Wnt蛋白的功能分析是针对稳定过表达的Wnt蛋白的基因引入的细胞制备的，并使用其细胞检查细胞增殖能力，细胞发挥作用能力和细胞浸润。为了阐明所产生的细胞对内含物Wnt信号途径和非辅音Wnt信号途径的影响，通过蛋白质印迹检查了分子基团和磷酸化的表达，这是每种途径的特征。研究结果：在使用过多的细胞的实验中，已经证实Wnt11参与了细胞增殖，运动和浸润，JNK和C-Jun的磷酸化水平已经增加，并且建议它是非。典型的Wnt信号途径被激活。还可以证实，肿瘤组织中的Wnt11 mRNA明显高于非肿瘤组织。另一方面，WNT3 mRNA表达没有确认显着差异。比较手术后一定期段内的一定期内无病的患者中的Wnt11 mRNA表达与手术后重复或死亡的患者的肿瘤组织进行比较，Wnt11在肿瘤组织中表达了复发或死亡的患者。已经确认该数量明显很高。最后，已经证实，在低表达组中，这两个基因的两个基因中，在WNT11和FZD7基因中高度表达的组都显着较短。这些结果表明，WNT11和FZD7之间的相互作用在结直肠癌的进展中起重要作用。