複数のウイルスでの宿主感染防御における抗体依存性細胞貪食の貢献度に関する研究

抗体依赖性细胞吞噬作用对宿主多种病毒感染防御的贡献研究

• 批准号: 22H04369
• 负责人: 山口 佳祐
• 金额: $ 0.31万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H04369/
• 关键词: 抗体依存性細胞貪食; ウイルス感染防御; 非中和抗体機能

ウイルスに対する感染防御において、中和活性を持たない抗体が有するエフェクター機能が着目されつつある。その1つに、抗体依存性細胞貪食（ADCP）が挙げられる。ADCPは、病原体と結合した特異的抗体のFcが食細胞のFcγ受容体に結合することで、食作用が亢進する現象である。これまでにインフルエンザウイルス（Flu）やHIVにおいて、感染リスクの減少に寄与することが報告された。しかし、感染防御に対する貢献度について未だ完全には明らかになっていない。本研究では、サイトメガロウイルス（CMV）、アデノウイルス（AdV）、Flu、アデノ随伴ウイルス（AAV）を対象とした。各ウイルスに対するモノクローナル抗体（mAb）が有するADCP活性を評価し、活性が認められたmAbに対してプラークアッセイにより感染防御への寄与度を解析した。CMV、Fluに対するmAbにおいてADCP活性を認めたが、AdVに対するmAbでは認められなかった。ADCP活性を認めたmAbを用いたプラークアッセイでは、プラークの減少に有意差を認めなかった。AAVに関して、ウイルス精製の収量に問題があり、必要な収量が得られなかったため、精製条件を改善して現在も継続中である。現段階では、プラークアッセイによる解析を通した感染防御への貢献度の解明には至っていない。原因として、病原体-抗体複合体と食細胞との反応時間が適切でない可能性がある。適切に評価できるアッセイへの改善が、今後の検討課題である。他方で、CMVに対するmAbに関して、ウイルス粒子に対するADCP活性と感染細胞に対する活性が異なった。これにより、ADCP活性を有する抗体だとしても、結合の対象がウイルス粒子か感染細胞かによってADCPを誘導できない可能性が考えられる。今後は、本研究課題で有望な結果が得られたCMVを対象とし、この点を含めた詳細な解析を予定している。

在保护感染侵害病毒时，没有中和活性的抗体具有的效应功能越来越集中。其中之一是抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP）。 ADCP是一种现象，当与病原体结合的特异性抗体结合到吞噬细胞的Fcγ受体时，吞噬作用会增强。据报道，流感病毒（流感）和HIV有助于降低感染的风险。但是，仍然尚不完全清楚其对感染保护的贡献。这项研究的重点是巨细胞病毒（CMV），腺病毒（ADV），流感和腺相关病毒（AAV）。评估了单克隆抗体（mAb）对每种病毒的ADCP活性，并通过斑块测定法对感染保护的贡献进行了分析，以分析具有活性的MAB。在针对CMV和流感的mAb中观察到ADCP活性，但在反对ADV的mAb中观察到。在使用具有ADCP活性的MAB的斑块测定中，在牙菌斑的减少中没有发现显着差异。关于AAV，病毒纯化的产量是有问题的，并且没有获得所需的收率，因此纯化条件已得到改善，目前的情况仍在进行中。在此阶段，尚未确定通过使用斑块测定法分析对感染保护的贡献。原因可能是病原体 - 抗体复合物与吞噬细胞之间的反应时间是不合适的。改进可以适当评估的测定方法将是未来考虑的话题。另一方面，ADCP对病毒颗粒和感染细胞的活性在对CMV的mAb方面有所不同。这使得即使抗体具有ADCP活性，ADCP也可能无法诱导ADCP，具体取决于结合靶标是病毒颗粒还是感染细胞。将来，我们计划提供详细的分析，包括有关CMV的这一点，这些CMV已从本研究主题中获得了有希望的结果。