複数のウイルスでの宿主感染防御における抗体依存性細胞貪食の貢献度に関する研究

抗体依赖性细胞吞噬作用对宿主多种病毒感染防御的贡献研究

• 批准号: 22H04369
• 负责人: 山口 佳祐
• 金额: $ 0.31万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H04369/
• 关键词: 抗体依存性細胞貪食; ウイルス感染防御; 非中和抗体機能

ウイルスに対する感染防御において、中和活性を持たない抗体が有するエフェクター機能が着目されつつある。その1つに、抗体依存性細胞貪食（ADCP）が挙げられる。ADCPは、病原体と結合した特異的抗体のFcが食細胞のFcγ受容体に結合することで、食作用が亢進する現象である。これまでにインフルエンザウイルス（Flu）やHIVにおいて、感染リスクの減少に寄与することが報告された。しかし、感染防御に対する貢献度について未だ完全には明らかになっていない。本研究では、サイトメガロウイルス（CMV）、アデノウイルス（AdV）、Flu、アデノ随伴ウイルス（AAV）を対象とした。各ウイルスに対するモノクローナル抗体（mAb）が有するADCP活性を評価し、活性が認められたmAbに対してプラークアッセイにより感染防御への寄与度を解析した。CMV、Fluに対するmAbにおいてADCP活性を認めたが、AdVに対するmAbでは認められなかった。ADCP活性を認めたmAbを用いたプラークアッセイでは、プラークの減少に有意差を認めなかった。AAVに関して、ウイルス精製の収量に問題があり、必要な収量が得られなかったため、精製条件を改善して現在も継続中である。現段階では、プラークアッセイによる解析を通した感染防御への貢献度の解明には至っていない。原因として、病原体-抗体複合体と食細胞との反応時間が適切でない可能性がある。適切に評価できるアッセイへの改善が、今後の検討課題である。他方で、CMVに対するmAbに関して、ウイルス粒子に対するADCP活性と感染細胞に対する活性が異なった。これにより、ADCP活性を有する抗体だとしても、結合の対象がウイルス粒子か感染細胞かによってADCPを誘導できない可能性が考えられる。今後は、本研究課題で有望な結果が得られたCMVを対象とし、この点を含めた詳細な解析を予定している。

在针对病毒的感染防御中，效应子具有无中和的抗体的功能。其中之一是抗体依赖性细胞吞噬（ADCP）。 ADCP是一种现象，其中特定抗体的Fc与病原体结合与细胞的Fcγ受体结合，从而增强食物作用。据报道，流感病毒（流感）和HIV导致感染风险降低。但是，对感染防御的贡献尚不清楚。在这项研究中，我们瞄准了巨藻病毒（CMV），腺病毒（ADV），流感，ADENA伴随病毒（AAV）（AAV）。评估了每种病毒的单克隆抗体（MAB）的ADCP活性，并分析了通过牙菌斑测定对感染防御的贡献程度的MAB，这已识别。在CMV和流感的MAB上发现了ADCP活性，但并未被MAB识别为ADV。使用MAB识别ADCP活性的MAB的牙菌斑测定在牙菌斑减少方面没有显着差异。关于AAV，病毒精炼的产量存在问题，并且没有获得必要的产量，因此纯化条件得到了改善，并且仍在继续。在此阶段，尚未通过斑块测定法分析来为感染防御做出贡献。作为原因，病原体抗体复合物与食物细胞之间的反应时间可能不合适。改进可以正确评估的测定法是将来的挑战。另一方面，关于CMV的mAb，病毒颗粒的ADCP活性和感染细胞的活性不同。结果，即使抗体具有ADCP活性，也可能无法通过病毒颗粒或感染细胞诱导ADCP。将来，计划在本研究问题中为CMV进行详细的分析，其中包括有希望的结果。