効率的な凍結胚移植用受容雌系統の検討

检查受体雌性系以进行有效的冷冻胚胎移植

• 批准号: 19924002
• 负责人: 大矢 康貴
• 金额: $ 0.47万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19924002/
• 关键词: マウス; 凍結胚; 受容雌

胚移植用受容雌には多産系で哺育の良好なICR系が汎用されている。しかし、限られた少数の凍結胚から産仔を作出する場合、1匹の受容雌に全ての胚を移植するのは、その雌が妊娠しなかった場合を考えると極めて危険である。更に、妊娠しても産仔数が少ない場合には過熟仔となりやすく、死産や喰殺等の可能性が高くなる。そこで、本研究では凍結胚の移植において、ICR系よりも効率的な移植用受容雌の検索を行った。受容雌にはICR系、CDF1、B6C3F1を用いた。移植胚はC57BL/6Jの9週齢の雌と12〜24週齢の雄から採取した卵子と精子を体外受精して得た胚を凍結後、融解して使用した。胚の採取・凍結・融解はマウス発生工学の操作手順に準拠して行った。実験I:ICR系の精管結紮マウスと交配させた場合の膣栓の形成率(膣栓の付いた匹数/交配させた匹数)を各マウス間で比較した。実験II:偽妊娠マウスに融解した胚を片側のみ10個、左右各5、7、10個ずつの4種のパターンで移植し、各マウスの妊娠率、産仔率、着床率を比較した。実験II:偽妊娠マウスに融解した胚を片側のみ10個、左右各5、7、10個ずつの4種のパターンで移植し、各マウスの妊娠率、産仔率、着床率を比較した。実験III:妊娠出産後1日で1匹当たりの哺育数を6匹に調整し、各マウスで哺育させ、これらの仔の体重を1、8、15、22日齢で測定し哺育能を比較した。実験I(膣栓形成率)、実験II(妊娠率、産仔率など)、実験III(哺育能)のいずれの項目においても、ICR系とCDF1、B6C3Fの間に有意差は認められなかった。寧ろ、ICR系はCDF1、B6C3F1に比べ、実験I〜IIIにおいて高値を示す傾向があり、CDF1やB6C3F1はICR系よりも受容雌として効率が良いとは言えなかった。一方、凍結胚ではなく新鮮胚を用いた同様の実験では、BDF1マウスはICR系に比べ受容雌として効率が良いと報告されており、我々の結果とは多少異なる傾向であったが、その原因は不明である。

作为胚胎移植的雌性受体，通常使用高产且具有良好培育特性的ICR品系。然而，当用有限数量的冷冻胚胎产生后代时，将所有胚胎移植到单个受体雌性体内是极其危险的，以防雌性不怀孕。而且，即使怀孕，如果后代数量少，后代也很可能过熟，增加死产或被吃掉的可能性。因此，在本研究中，我们寻找冷冻胚胎移植的受体女性，这比ICR系统更有效。 ICR 系、CDF1 和 B6C3F1 用于雌性受体。移植胚胎是通过从 9 周龄 C57BL/6J 雌性和 12 至 24 周龄雄性收集的卵子和精子进行体外受精获得的，并将其冷冻然后解冻。按照小鼠发育工程操作程序收集、冷冻和解冻胚胎。实验I：比较每只小鼠与ICR血管结扎小鼠交配时的阴道栓形成率（具有阴道栓的小鼠数量/交配小鼠数量）。实验二：我们将解冻的胚胎以一侧10个、每侧5、7、10个四种不同的方式植入假孕小鼠体内，并比较每只小鼠的妊娠率、产仔率和着床率。实验二：我们将解冻的胚胎以一侧10个、每侧5、7、10个四种不同的方式植入假孕小鼠体内，并比较每只小鼠的妊娠率、产仔率和着床率。实验三：在怀孕和出生后第1天将每只小鼠的哺乳次数调整为6只，让每只小鼠哺乳，并在1、8、15和22日龄时测量这些幼仔的体重，并比较其哺乳能力。 。 ICR系统、CDF1和B6C3F在实验I（阴道栓子形成率）、实验II（妊娠率、产仔率等）和实验III（护理能力）的任何项目中均未观察到显着差异。 。相反，ICR系在实验I至III中倾向于显示比CDF1和B6C3F1更高的值，并且不能说CDF1和B6C3F1作为受体雌性比ICR系更有效。另一方面，在使用新鲜胚胎代替冷冻胚胎的类似实验中，据报道，BDF1 小鼠作为受体雌性比 ICR 品系更有效，这与我们的结果略有不同，但其原因是未知。