効率的な凍結胚移植用受容雌系統の検討

检查受体雌性系以进行有效的冷冻胚胎移植

• 批准号: 19924002
• 负责人: 大矢 康貴
• 金额: $ 0.47万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19924002/
• 关键词: マウス; 凍結胚; 受容雌

胚移植用受容雌には多産系で哺育の良好なICR系が汎用されている。しかし、限られた少数の凍結胚から産仔を作出する場合、1匹の受容雌に全ての胚を移植するのは、その雌が妊娠しなかった場合を考えると極めて危険である。更に、妊娠しても産仔数が少ない場合には過熟仔となりやすく、死産や喰殺等の可能性が高くなる。そこで、本研究では凍結胚の移植において、ICR系よりも効率的な移植用受容雌の検索を行った。受容雌にはICR系、CDF1、B6C3F1を用いた。移植胚はC57BL/6Jの9週齢の雌と12〜24週齢の雄から採取した卵子と精子を体外受精して得た胚を凍結後、融解して使用した。胚の採取・凍結・融解はマウス発生工学の操作手順に準拠して行った。実験I:ICR系の精管結紮マウスと交配させた場合の膣栓の形成率(膣栓の付いた匹数/交配させた匹数)を各マウス間で比較した。実験II:偽妊娠マウスに融解した胚を片側のみ10個、左右各5、7、10個ずつの4種のパターンで移植し、各マウスの妊娠率、産仔率、着床率を比較した。実験II:偽妊娠マウスに融解した胚を片側のみ10個、左右各5、7、10個ずつの4種のパターンで移植し、各マウスの妊娠率、産仔率、着床率を比較した。実験III:妊娠出産後1日で1匹当たりの哺育数を6匹に調整し、各マウスで哺育させ、これらの仔の体重を1、8、15、22日齢で測定し哺育能を比較した。実験I(膣栓形成率)、実験II(妊娠率、産仔率など)、実験III(哺育能)のいずれの項目においても、ICR系とCDF1、B6C3Fの間に有意差は認められなかった。寧ろ、ICR系はCDF1、B6C3F1に比べ、実験I〜IIIにおいて高値を示す傾向があり、CDF1やB6C3F1はICR系よりも受容雌として効率が良いとは言えなかった。一方、凍結胚ではなく新鮮胚を用いた同様の実験では、BDF1マウスはICR系に比べ受容雌として効率が良いと報告されており、我々の結果とは多少異なる傾向であったが、その原因は不明である。

多产且喂养良好的ICR系统通常用于接受胚胎转移的女性。但是，当雌性没有怀孕的情况下，将所有胚胎植入一个接受雌性的胚胎中，将所有胚胎植入一个接受雌性的卵泡时，将所有胚胎植入一个接受雌性的牛犊时，这是极其危险的。此外，如果犊牛的数量即使在怀孕后也很少，它可能会变得过高，并且死产或饮食的可能性很高。因此，在这项研究中，我们比ICR系统更有效地搜索了对冷冻胚胎移植的女性。 ICR系统，CDF1和B6C3F1用于女性接受。通过从C57BL/6J女性和12-24周大的男性中收集的卵和精子获得的胚胎获得的胚胎被冷冻并解冻。根据小鼠发育工程的操作程序收集，冷冻并解冻胚胎。实验I：与ICR VAS deferens交配时，阴道塞的形成速率（阴道塞的数量/配偶小鼠数）在每只小鼠之间进行了比较。实验II：植入伪久的小鼠中解冻的胚胎以四种不同的模式植入：仅一侧的10个胚胎，左侧和右侧的5、7和10个胚胎，并比较每只小鼠的妊娠率，出生率和植入率。实验II：植入伪久的小鼠中解冻的胚胎以四种不同的模式植入：仅一侧的10个胚胎，左侧和右侧的5、7和10个胚胎，并比较每只小鼠的妊娠率，出生率和植入率。实验III：将每只动物的喂养量调节到怀孕和出生后每天六个，并喂食每只小鼠，并在1、8、15和22天大的时候测量这些幼崽的重量，以比较其喂养能力。在以下任何一个类别中，ICR系统，CDF1或B6C3F之间尚未发现显着差异：实验I（阴道塞形成率），实验II（妊娠率，出生率等）或实验III（营养能力）。相反，ICR系统在实验I-III中倾向于比CDF1和B6C3F1表现出更高的值，而CDF1和B6C3F1的效率并不比ICR系统更有效。另一方面，在使用新鲜胚胎而不是冷冻胚胎的类似实验中，据报道，BDF1小鼠作为受体女性的效率比ICR系统更有效，尽管其原因与我们的结果略有不同，但尚不清楚。