先天性水頭症の疾患遺伝子を水頭症発症ラットで追求する

寻找脑积水大鼠先天性脑积水的疾病基因

基本信息

批准号：
12780572
负责人：
佐久間覚
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kansai Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780572/
关键词：
HTX Rat differential display in situ hybridization Northern hybridization

项目摘要

先天性水頭症発症(HTX)ラットを用い先天性水頭症に関連する発現遺伝子のクローニングを企画した。1.HTXラットおよび対照ラット(非発症個体)の脳よりmRNAを得た。2.Differential display法により同一週齢の水頭症発症個体と非発症個体の脳のmRNAの比較を行った。3.水頭症発症個体に発現するmRNA由来のcDNA断片を得た。4.これらのcDNA断片をもとに塩基配列を検索した。5.塩基配列の確定したcDNA断片の多くは既知の塩基配列であり、少数のcDNA断片は未知の塩基配列であったが、cDNAライブラリを用いて後者の完全長cDNAクローンを確定した。6.新規遺伝子を確定し、それが水頭症発症に密接に関与することを検定した。7.水頭症発症の原因遺伝子候補にイオンチャネル型神経伝達物質受容体がある。In silicoクローニング法により、リガンド作動性イオンチャネル型受容体の新規遺伝子をクローニングした。8.現在、本遺伝子の脳内特異的発現について、ノザンブロツト法、in situハイブリダイゼーション法、免疫組織化学法によって解析を実施した。9.結果的に水頭症との関連が濃厚になれば、本遺伝子の変異を動物に導入する。この目的で本遺伝子のゲノムマップを行ったところ、第17番染色体に局在することが判明した。

计划在用于发展先天性脑积水的大鼠中与先天性脑积水相关的表达基因的克隆。 1。MRNA是从HTX大鼠和对照大鼠（非发病个体）的大脑中获得的。 2。我们比较了使用差分显示方法在同一年龄和非发病人群中脑积水个体的大脑mRNA。 3。获得源自在脑积水个体中表达的mRNA的cDNA片段。 4。基于这些cDNA片段搜索了基本序列。 5。尽管大多数具有确认碱基序列的cDNA片段是已知的碱序列，但少数cDNA片段具有未知的碱基序列，但使用cDNA文库确认了后者的全长cDNA克隆。 6.新基因被确认并测试了它们在脑积水发展中的密切参与。 7。离子性神经递质受体是引起脑积水发育的候选基因。配体能力离子受体的一种新型基因通过硅克隆方法克隆。 8。目前，该基因的大脑特异性表达已通过北印迹，原位杂交和免疫组织化学进行了分析。 9.如果与脑积水的关联可能更有可能，则该基因的突变将引入动物。为此目的进行了该基因的基因组图，并发现它本地化为17染色体。