アルツハイマー病におけるPKB・GSK3系の変化に関する研究

阿尔茨海默病中PKB/GSK3系统变化的研究

基本信息

批准号：
10770484
负责人：
田中稔久
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

アルツハイマー病における異常リン酸タウ蛋白の産生メカニズムについて知るために、タウ蛋白のリン酸化酵素の一つであるグリコーゲンシンターゼキナーゼ3(GSK3)、および細胞内情報伝達系においてGSK3の活性をリン酸化によって抑制的に制御するプロテインキナーゼB(PKB)とプロテインキナーゼC(PKC)について検討をおこなった。まずGSK3の活性化レベルを識別するリン酸化特異性抗体(OPR-1)を作成し、その免疫組織学的検討では、海馬の神経細胞、得にCA1の錐体細胞および歯状核の顆粒細胞が染色された。次に、293T細胞へのPKB遺伝子とタウ遺伝子のトランスフェクションをおこなうと、内在性のGSK3はPKBによってリン酸化され、GSK3活性は抑制され、さらにタウ蛋白のリン酸化レベルが減少した。また、PKBを制御する細胞内情報伝達系の上流にあるフォスファチジルイノシトール3キナーゼのインヒビターであるwortmanninを神経芽細胞腫に添加すると、GSK3は一次的に立つ脱リン酸化、タウ蛋白は一次的にリン酸化を起こした。この過程においてGSK3の再リン酸化とタウ蛋白の再脱リン酸化は、アポトーシスのメカニズムによって活性化されたPKCδによるGSK3のリン酸化が原因であることを突き止めた。そして、GSK3の活性制御においてPKC群はあまり注目されていなかったが、この研究によりその重要性が再認識された。そして、GSK3のキナーゼ活性を直接抑制するリチウムとバルプロ酸はタウ蛋白の脱リン酸化を誘導し、この機序にはGSK3への直接の抑制機序に加えてPKCなどを介する間接の抑制機序が存在することが明らかとなった。

为了了解阿尔茨海默氏病中异常Tau磷酸盐产生的机制，我们研究了糖原合酶激酶3（GSK3），tau蛋白的磷酸酶之一，蛋白激酶B（PKB）和蛋白质激酶C（PKC），这些蛋白质激酶C（PKC）均抑制了gsk3的活性。磷酸化。首先，准备一种磷酸化特异性抗体（OPR-1）来鉴定GSK3的激活水平，免疫组织学检查表明，海马神经元以及CA1和齿状核的颗粒细胞的锥体细胞。接下来，当用PKB和TAU基因转染293T细胞时，内源性GSK3被PKB磷酸化，抑制GSK3活性，并进一步降低Tau蛋白的磷酸化水平。此外，当wortmannin是磷脂酰肌醇3激酶的抑制剂时，它位于调节PKB的细胞内信号系统的上游时，GSK3添加到神经母细胞瘤中，GSK3是原发性去磷酸酯，而TAU蛋白是一级磷酸化。在此过程中，我们发现gsk3和tau蛋白重新磷酸化的重透化是由PKCδ磷酸化引起的，PKCΔ被凋亡的机制激活。此外，尽管PKC组在控制GSK3活动方面很少关注，但这项研究重申了其重要性。锂和丙戊酸直接抑制GSK3激酶活性，诱导tau蛋白的去磷酸化，并且已经发现，除了直接抑制GSK3的直接抑制机制外，该机制中还存在间接抑制机制，例如PKC。